1.一種表面等離子體共振(SPR)傳感芯片，其特征在于，所述SPR傳感芯片的結構為，先
在基質玻璃片表面依次鍍上鉻膜和金膜，在所鍍的金膜表面修飾生物素-miRNA探針，所述
修飾生物素-miRNA探針用三(2-羧乙基)膦(TCEP)還原巰基，用6-巰基1-己醇(MCH)封堵。
2.如權利要求1所述傳感芯片的制備方法，其特征在于，首先在基質玻璃片上制備厚度
為1～3nm的鉻膜，在其上制備厚度為40～60nm的金膜；然后在金膜上固定探針，將包含三
(2-羧乙基)膦(TCEP)的磷酸緩沖液(PBS)的生物素-miRNA探針滴到金膜上，過夜；固定探針
后，用PBS溶液洗去未結合的探針，將得到的金膜用6-巰基1-己醇(MCH)封堵后沖洗，得到
SPR傳感芯片。
3.根據權利要求2所述傳感芯片的制備方法，其特征在于，所述金膜上固定探針的方法
為，將25μL 0.1μM的生物素-miRNA探針滴到金膜上，其中包含0.1M,pH 7.4磷酸緩沖液
(PBS)，在PBS中含有2μM三(2-羧乙基)膦(TCEP)。
4.根據權利要求2所述傳感芯片的制備方法，其特征在于，固定探針經過清洗后，用
1.45×10-6M的6-巰基1-己醇(MCH)封堵。
5.如權利要求1所述傳感芯片的應用，其特征在于，所述SPR傳感芯片與金納米棒
(GNRs)-鏈霉親和素用于檢測miRNA、DNA、蛋白質、抗原的含量。
6.根據權利要求5所述傳感芯片的應用，其特征在于，所述miRNA含量的檢測，是將SPR
傳感芯片置于SPR檢測通道上、將不同濃度的目標miRNA注射到流動分析池，miRNA與生物
素-miRNA探針雜交形成雙鏈使生物素暴露出來，記錄其對應的SPR信號響應；然后在低濃度
miRNA時，注入GNRs-鏈霉親和素，記錄其對應的SPR信號響應，根據標準曲線，確定miRNA的
濃度；低濃度miRNA時所用的緩沖液是PH值為7.4的10mM PBS。
7.根據權利要求6所述傳感芯片的應用，其特征在于，所述檢測結束后，向SPR檢測通道
中分別注射2mM的NaOH和2mM的HCl，用于洗脫結合的GNRs-鏈霉親和miRNA，即可測試下一個
樣品。
8.根據權利要求5所述傳感芯片的應用，其特征在于，所述方法可測量的miRNA低濃度
為0.1～100pM。
9.根據權利要求5所述傳感芯片的應用，其特征在于，所述金納米棒、(GNRs)-鏈霉親和
素的制備步驟為：
(1)GNRs合成：將19.5mL、0.1M，30℃溶解十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)溶液和0.5mL、
0.01M四氯金酸水合物(HAuCl4·3H2O)溶液混合好后，加入1.2mL、0.01M配置好的硼氫化鈉
溶液，快速攪拌混合2分鐘，然后在25℃-27℃下熟化5-10分鐘，即得種子溶液；將19mL CTAB
溶液和0.16mL、0.01M現配現用硝酸銀溶液在25℃-27℃下混合10分鐘，將1mLHAuCl4·3H2O
溶液加入其中，約5-10分鐘后加入0.1M的抗壞血酸溶液，手搖混勻，即得生長溶液；最后將
0.032mL種子溶液加入生長溶液中，攪動1分鐘左右，放入25℃-27℃水浴中生長，不要任何
攪拌靜置17個小時，生長后將金納米棒在13000rpm下離心12分鐘，重復三次除去多余的
CTAB，最后將金納米棒分散在等濃度的CTAB里；
(2)GNRs-鏈霉親和素制備：用1‐乙基‐(3‐二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC)來
活化硫辛酸(TA)的羧基，然后與鏈霉親和素的胺基結合，將GNRs與鏈霉親和素進行端部結
合的步驟是：首先將3mL再分散的GNRs溶液逐滴加入6mL、2×10-8M稀釋的鏈霉親和素溶液
中，輕搖4小時；反應后，將結合的金棒在12000rpm下離心10分鐘，重復三次，每次離心都用
含0.1％、0.005M、PH為3.8聚乙二醇(PEG)的CTAB溶液進行懸浮，最后將修飾的GNRs重新分
散在300μL、0.005M、PH為3.8含0.1％PEG的CTAB溶液中，4℃下保存，制得GNRs-鏈霉親和素。
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