本發(fā)明涉及一種肺炎克雷伯氏菌的鑒定方法及所用引物，屬于生物技術領域。本發(fā)明通過創(chuàng)造勞動獲取了兩對引物（人工合成基因序列），采用該引物對肺炎克雷伯氏菌、大腸桿菌和綠膿桿菌進行PCR擴增，擴增產(chǎn)物為肺炎克雷伯氏菌的特異性序列；從而能夠?qū)⒎窝卓死撞暇c大腸桿菌和綠膿桿菌區(qū)分開來。本發(fā)明的用于鑒定肺炎克雷伯氏菌的引物，包含引物對K1或/和引物對K2；其中，K1包括K1?F和K1?R，K2包括K2?F和K2?R；所述K1?F、K1?R、K2?F、K2?R的核苷酸序列分別為序列表中的SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4。

1.一種用于鑒定肺炎克雷伯氏菌的引物，其特征在于，包含引物對K1或/和引物對K2；
其中，K1包括K1-F和K1-R，K2包括K2-F和K2-R；
所述K1-F、K1-R、K2-F、K2-R的核苷酸序列分別為序列表中的SEQ ID NO.1、SEQ ID
NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4。
2.一種用于鑒定肺炎克雷伯氏菌的檢測試劑，其特征在于，包含權(quán)利要求1所述的引物
對K1或/和引物對K2。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測試劑，其特征在于，還包含PCR試劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測試劑，其特征在于，所述PCR試劑包含聚合酶鏈式反應中
所用的dNTP、Taq DNA聚合酶、MgCl₂和PCR反應緩沖液。
5.一種非疾病診斷目的的肺炎克雷伯氏菌的鑒定方法，其特征在于，用權(quán)利要求1所述
的引物或權(quán)利要求2、3或4的檢測試劑對待測樣品進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物；用瓊脂
糖凝膠電泳或測序法檢測PCR擴增產(chǎn)物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的鑒定方法，其特征在于，取4μL待測樣品、4μL引物對K1或/和引
物對K2和25μL PCR試劑，用滅菌雙蒸水補充至50μL；第一步，94℃預變性5min；第二步，94℃
變性30s；第三步，58℃退火30s；第四步，72℃延伸1min；第二步到第四步共進行35個循環(huán)；
第五步，72℃終延伸7min，得PCR擴增產(chǎn)物；取5μl擴增產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳，電泳結(jié)
果在BIO-RAD紫外凝膠成像系統(tǒng)上照相。