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一種優質肉雞多目標性狀的快速聚合育種方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-30
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201611183590.1 
  • 技術(專利)名稱 一種優質肉雞多目標性狀的快速聚合育種方法 
  • 項目單位 江蘇省家禽科學研究所
  • 發明人 趙振華,盧建,李新,黎壽豐,李春苗,黃華云,王錢保,吳兆林,劉一帆,趙東偉,梁忠 
  • 行業類別 中藥材獲取-動植物采集
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 李耀環
  • 發布時間 2021-12-30  
  • 01

    項目簡介

    一種多目標性狀的快速聚合育種方法,包括以下步驟:1、雞的基因組DNA提取;2、引物設計:根據生長分化因子9、雌激素受體、多巴胺受體1、多巴胺受體2、血管活性腸肽受體2基因序列設計聚合酶鏈式反應擴增引物;3、聚合酶鏈式反應;4、單核苷酸多態性反應;5.目的片段經SSCP分析,凝膠電泳后用銀染顯色,得到DNA的SSCP圖譜,根據5個圖譜中的帶型選擇選擇生長分化因子9、雌激素受體、多巴胺受體1、多巴胺受體2、血管活性腸肽受體2、基因的基因型分別為QQ、GG、KK、TT、TT基因型的個體。本發明方法效果顯著,檢測方法簡單快捷,且不受外界環境的影響,形成一種高效、快速的優質肉雞聚合育種新方法。
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  • 02

    說明書

    1.一種優質肉雞多目標性狀的快速聚合育種方法,其特征是,包括以下步驟:(1)提取雞的基因組DNA;(2)引物設計:根據雞的生長分化因子9、雌激素受體、多巴胺受體1、多巴胺受體2、血管活性腸肽受體2基因序列設計聚合酶鏈式反應擴增引物;生長分化因子9上游引物序列5’-tggagggtacgtggaggat-3’,下游引物序列5’-cacacctacctgtaatcggt-3’;雌激素受體上游引物序列:5’-gatgcacgcatagcttttca-3’,下游引物序列:5’-acggaaaagagtcagcctca-3’多巴胺受體1上游引物序列:5’-gctgtggctgagtttccttc-3’,下游引物序列:5’-acccttggaacacactgagg-3’;多巴胺受體2上游引物序列:5’-aacccaccctcctcagactt-3’;下游引物序列:5’-ggatggagatgggagacaga-3’;血管活性腸肽受體2基因序列上游引物序列:5’-gttggggagtggaggttcag-3’;下游引物序列:5’-attgggctggagatggcaaa -3’;(3)聚合酶鏈式反應:采用20 μL反應體系:在PCR反應管中25 mmol/L 10×buffer 2 μL;10 pmol/μL Mg2+ 2.2 μL;2.5 mmol/L dNTPs 0.8 μL,DNA 模板1 μL,10 pmol/L生長分化因子9上、下游引物各1 μL、或者10 pmol/L雌激素受體上、下游引物各1 μL、或者10pmol/L多巴胺受體1上、下游引物各1 μL、或者10 pmol/L多巴胺受體2上、下游引物各1 μL、或者10 pmol/L血管活性腸肽受體2基因序列上、下游引物各1 μL,5 U/μL TaqDNA 聚合酶0.2 μL,加超純水至20μL,將PCR反應管放入PCR儀分別進行反應擴增;(4)單核苷酸多態性反應:2 μL PCR 擴增產物加入 7 μL 上樣緩沖液,98 ℃變性 10min,然后冰浴 5 min;過夜凝膠電泳;(5)目的片段經SSCP分析,凝膠電泳后用銀染顯色,得到DNA的SSCP圖譜,根據5個圖譜中的帶型選擇選擇生長分化因子9、雌激素受體、多巴胺受體1、多巴胺受體2、血管活性腸肽受體2基因的基因型分別為QQ、GG、KK、TT、TT基因型的個體。2.根據權利要求1所述的優質肉雞多目標性狀的快速聚合育種方法,其特征是,所述PCR擴增反應程序為: 94 ℃預變性 5 min;94 ℃變性 30 s,退火 30 s,72 ℃延伸 30 s,30 個循環;最后 72 ℃延伸10 min,4℃保存,5對引物的退火溫度分別為58℃、60℃、60℃、59℃和61℃。3.根據權利要求1所述的優質肉雞多目標性狀的快速聚合育種方法,其特征是,步驟(4)中所述凝膠電泳中聚丙烯酰胺凝膠濃度為 10 %,凝膠交聯度為 29:1,電壓都為 150V。
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