本發(fā)明涉及制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種氣泡上升法檢測(cè)纖溶酶效價(jià)的方法。所述方法選用pH6-9的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液作溶劑，用1-10BP單位/毫升的凝血酶溶液與1-10毫克/毫升的纖維蛋白原溶液制備底物，纖溶酶標(biāo)準(zhǔn)品用pH6-9的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液稀釋成每1毫升中10-1000單位的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按所述方法制備制成標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線。供試品用pH6-9的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液稀釋成每1毫升中約含10-1000單位的供試品溶液，同法測(cè)定，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算供試品的效價(jià)。本發(fā)明消除了不同來(lái)源纖維蛋白原對(duì)纖溶酶效價(jià)測(cè)定的干擾，檢驗(yàn)操作簡(jiǎn)便快速，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，解決了纖溶酶質(zhì)量控制的關(guān)鍵技術(shù)方法，從而使纖溶酶產(chǎn)業(yè)化過(guò)程質(zhì)量控制準(zhǔn)確、穩(wěn)定、可行。

1.一種氣泡上升法檢測(cè)纖溶酶效價(jià)的方法，其特征在于，所述方法為：一、配制供試品溶液：取供試品纖溶酶適量，然后加入pH6-9?的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液，根據(jù)供試品效價(jià)估計(jì)值將所述供試品纖溶酶稀釋為每1毫升中含50-200?單位的溶液；二、配制纖溶酶標(biāo)準(zhǔn)品溶液：取纖溶酶標(biāo)準(zhǔn)品適量，加入pH6-9?的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液稀釋成每1?毫升中含50-200?單位的至少兩種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液；三、測(cè)定方法：取若干試管，各精密加入1-10?毫克/毫升的纖維蛋白原溶液0.1-1.0?毫升，將各試管置于37±0.5?攝氏度水浴中保溫2-4?分鐘，然后在各試管中加入1-10BP?單位/毫升的凝血酶溶液0.1-1.0?毫升，同時(shí)精密加入步驟（二）所得標(biāo)準(zhǔn)品溶液或步驟（一）所得供試品溶液0.1-1.0?毫升，立即搖勻并計(jì)時(shí)，各試管中的反應(yīng)物質(zhì)在10?秒內(nèi)凝結(jié)，當(dāng)凝塊內(nèi)的小氣泡上升到反應(yīng)系統(tǒng)體積的一半時(shí)，立即分別記時(shí)，然后以纖溶酶標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，以反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)間的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸并繪出線性回歸曲線，根據(jù)線性回歸曲線求得所述供試品溶液的效價(jià)。2.根據(jù)權(quán)利要求1?所述的氣泡上升法檢測(cè)纖溶酶效價(jià)的方法，其特征在于：所述步驟（三）為：?取試管若干支，各精密加入2.5mg/ml?的纖維蛋白原溶液0.5ml，置37℃±0.5℃水浴中保溫約3?分鐘，加入2.5BP?單位/ml?的凝血酶溶液0.5ml，同時(shí)精密加入步驟（二）所述標(biāo)準(zhǔn)品溶液或步驟（一）所述供試品溶液各0.2ml，立即搖勻并計(jì)時(shí)，反應(yīng)系統(tǒng)應(yīng)在10?秒內(nèi)凝結(jié)，當(dāng)凝塊內(nèi)小氣泡上升到反應(yīng)系統(tǒng)體積一半時(shí)作為反應(yīng)終點(diǎn)，立即記時(shí)，每種濃度測(cè)3次，3?次測(cè)定中最大值與最小值的差不得超過(guò)平均值的10%，求平均值，以纖溶酶標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，以反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)間的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，用線性回歸方程求得供試品溶液的效價(jià)。3.根據(jù)權(quán)利要求1?所述的氣泡上升法檢測(cè)纖溶酶效價(jià)的方法，其特征在于：所述pH6-9?的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液配制方法為：取三羥甲基氨基甲烷適量，加水500?毫升溶解后，加0.1?摩爾/升鹽酸溶液適量，混勻，調(diào)節(jié)pH?至6-9，再加水稀釋至1000?毫升。4.根據(jù)權(quán)利要求1?所述的氣泡上升法檢測(cè)纖溶酶效價(jià)的方法，其特征在于：所述1-10BP?單位/毫升的凝血酶溶液的配制方法為：取凝血酶，加入pH?6-9?三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液溶解并稀釋成每1?毫升中含1-10BP?單位的溶液。5.根據(jù)權(quán)利要求1?所述的氣泡上升法檢測(cè)纖溶酶效價(jià)的方法，其特征在于：所述1-10?毫克/毫升的纖維蛋白原溶液的配制方法為：取纖維蛋白原，加pH?6-9?的三羥甲基氨基甲烷緩沖液溶解并稀釋成每1?毫升中含可凝固蛋白1-10?毫克的溶液。