本發明公開了一種尿激酶與人尿胰蛋白酶抑制劑的分離方法。該方法包括如下步驟：將含有尿激酶和人尿胰蛋白酶抑制劑的溶液，調節pH；緩慢加入硫酸銨粉末，一邊加硫酸銨粉末，一邊攪拌直到溶液中出現明顯蛋白沉淀；調節pH至9.0±0.6；靜置后，離心或者加硅藻土過濾，收集富含尿激酶的沉淀，獲得尿激酶；上清繼續加入硫酸銨至，一邊加硫酸銨粉末，一邊攪拌使其溶解；靜置后，離心或者加硅藻土過濾，收集富含人尿胰蛋白酶抑制劑沉淀2，獲得人尿胰蛋白酶抑制劑。該方法簡便可行，周期短，有效保護UK和UTI活性，減少UK降解，提高UK質量，不需要特殊設備，降低設備的投入成本。

1.一種尿激酶與人尿胰蛋白酶抑制劑的分離方法，其特征在于，包括如
下步驟：
1)將含有尿激酶和人尿胰蛋白酶抑制劑的溶液，調節pH至9.0±0.6；
2)緩慢加入16－30％（w/v）硫酸銨粉末，一邊加硫酸銨粉末，一邊攪
拌使其溶解，直到溶液中出現明顯蛋白沉淀；
3)調節pH至9.0±0.6；
4)靜置1－6小時后，離心或者加硅藻土過濾，收集富含尿激酶的沉淀
1，獲得尿激酶；
5)上清繼續加入硫酸銨至55％（w/v）以上，一邊加硫酸銨粉末，一邊
攪拌使其溶解；
6)靜置1－6小時后，離心或者加硅藻土過濾，收集富含人尿胰蛋白酶
抑制劑沉淀2，獲得人尿胰蛋白酶抑制劑。
2.根據權利要求1所述的尿激酶與人尿胰蛋白酶抑制劑的分離方法，其特
征在于：步驟1和步驟3中調節pH使用氫氧化鈉溶液或氨水溶液。
3.根據權利要求1所述的尿激酶與人尿胰蛋白酶抑制劑的分離方法，其特
征在于：步驟2中，在溶液中出現明顯蛋白沉淀后，再補加1-5%（w/v
）硫酸銨粉末，并溶解。
4.根據權利要求1、2或3所述的尿激酶與人尿胰蛋白酶抑制劑的分離方法
，其特征在于：所述的硫酸銨粉末也可以采用相當量的硫酸銨溶液替
代。