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鱈魚皮寡肽及其分離純化方法和在制備ɑ-葡萄糖苷酶抑制劑及抗Ⅱ型糖尿病藥物中的應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-20
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201910091803.5 
  • 技術(專利)名稱 鱈魚皮寡肽及其分離純化方法和在制備ɑ-葡萄糖苷酶抑制劑及抗Ⅱ型糖尿病藥物中的應用 
  • 項目單位 浙江省醫學科學院
  • 發明人 賈建萍,包國良,李青青 
  • 行業類別 中藥材獲取-動植物采集
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 錢馨翼
  • 發布時間 2022-01-20  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種鱈魚皮寡肽及其分離純化方法和應用,該鱈魚皮寡肽的氨基酸序列分別為Glu?Gly?Gly?Tyr?Thr?Arg、Tyr?Val?Arg或Phe?Tyr?Glu。分離純化方法包括:以阿拉斯加狹鱈魚皮為原料,蛋白酶酶解法制備鱈魚皮膠原肽混合肽;再依次進行超濾處理、葡聚糖凝膠色譜柱粗分以及高效液相色譜分離;葡聚糖凝膠色譜柱由葡聚糖凝膠樹脂Sephadex G?25和葡聚糖凝膠樹脂Sephadex G?50串聯而成。經活性試驗發現,該三種鱈魚皮寡肽具有ɑ?葡萄糖苷酶抑制活性,能輔助降血糖,可用于制備抗Ⅱ型糖尿病藥物。
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  • 02

    說明書

    1.一種鱈魚皮寡肽,其特征在于,氨基酸序列為Glu-Gly-Gly-Tyr-Thr-Arg。2.一種根據權利要求1所述的鱈魚皮寡肽的分離純化方法,其特征在于,包括:(1)以阿拉斯加狹鱈魚皮為原料,經蛋白酶酶解法制備鱈魚皮膠原肽混合肽;所述蛋白酶酶解法具體為:將阿拉斯加狹鱈魚皮、胰酶與水混合,在52~58℃、pH=5.5~6.5下酶解6~10h;以阿拉斯加狹鱈魚皮的質量計,所述胰酶的加入量為0.15~0.25wt%;所述阿拉斯加狹鱈魚皮與水的質量比為1:4~8;(2)采用截留分子量為3000Da的超濾膜對步驟(1)制備的鱈魚皮膠原肽混合肽進行超濾處理,再經濃縮、干燥得到鱈魚皮膠原肽;(3)以水為流動相,采用葡聚糖凝膠色譜柱對步驟(2)制備的鱈魚皮膠原肽進行粗分;所述葡聚糖凝膠色譜柱的填料由葡聚糖凝膠樹脂Sephadex G-25和葡聚糖凝膠樹脂Sephadex G-50串聯而成;所述葡聚糖凝膠樹脂Sephadex G-25選自100目,葡聚糖凝膠樹脂Sephadex G-50選自60目;所述流動相的流速為0.8~1.4mL/min;(4)利用高效液相色譜技術將步驟(3)的粗分產物進一步分離,得到三種鱈魚皮寡肽;色譜柱:Angilent Eclipse XDB-C18柱;流動相:A液:0.05%三氟乙酸-水溶液;B液:0.05%三氟乙酸-乙腈溶液;采用線性梯度洗脫,0~20min,5%~20%B;20~25min,20%~100%B;流速為1.0mL/min,柱溫為30℃,檢測波長為220nm。3.根據權利要求2所述的鱈魚皮寡肽的分離純化方法,其特征在于,步驟(1)中,所述蛋白酶酶解法:將阿拉斯加狹鱈魚皮、胰酶與水混合,在55℃、pH=6.0下酶解8h;以阿拉斯加狹鱈魚皮的質量計,所述胰酶的加入量為0.20wt%;所述阿拉斯加狹鱈魚皮與水的質量比為1:6。4.根據權利要求2所述的鱈魚皮寡肽的分離純化方法,其特征在于,步驟(2)中,所述超濾膜選自中空纖維聚砜超濾膜。5.一種根據權利要求1所述的鱈魚皮寡肽在制備ɑ-葡萄糖苷酶抑制劑中的應用。6.一種根據權利要求1所述的鱈魚皮寡肽在制備抗Ⅱ型糖尿病藥物中的應用。
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