本發明公開了PCR檢測方法和組合物。具體而言，公開的是采用一組針對多個靶基因的引物進行PCR擴增，依據擴增結果，確定靶基因的存在狀況，從而確定樣品是包含哪一種靶基因的類型。公開了一種能夠同時檢測多至五種致腹瀉大腸埃希菌的多重PCR試劑盒，利用該試劑盒快速檢測多種致腹瀉大腸埃希菌的方法以及該方法在同時檢測多種大腸埃希菌中的應用。該方法克服了傳統方法中存在的不足，提高了檢測的速度、敏感性和特異性，比常規的細菌學診斷快速、簡便和實用。

1.一種PCR試劑盒，用于多種致腹瀉大腸埃希菌的分型檢測，該試劑盒包括：1).分別特異于基因eaeA，aggR，ipaH，lt和stxl的五種引物對按摩爾數10～15∶15～20∶1∶15～25∶20～30比例混合的引物混合物；其中，特異于基因eaeA引物對：其中一個序列是：AACATTATGGAACGGCAGAGGT；另一個序列是：GTAAAGCGGGAGTCAATGTAACG；特異于基因aggR引物對：其中一個的序列是：GCTGATGCTGACGATTCTGTATT；另一個的序列是：TCCTTCTCGATTGTGTTTCTGAC；特異于基因ipaH引物對：其中一個的序列是：GCGCTCACATGGAACAATCTC；另一個的序列是：TCACTCCCGACACGCCATAG；特異于基因lt引物對：其中一個的序列是：GCATAATGAGTACTTCGATAGAGGA；另一個的序列是：TCACACCAAAATTAACACGATACC；特異于基因stxl引物對：其中一個的序列是：CATTCGTTGACTACTTCTTATCTGG；另一個的序列是：TAGGTACAATTCTGGCAACTCG2).PCR反應緩沖液，聚合酶，dNTP；3).對應1)中引物對的標準陽性模板；4).一份進行PCR反應的說明書；以及5).上述1)到4)被包裝在包裝材料中。2.根據權利要求1所述PCR試劑盒，其特征在于，其中所述引物混合物以eaeA，aggR，ipaH，lt和stxl五種引物對按摩爾比418∶482∶32∶627∶739混合。3.根據權利要求1所述PCR試劑盒，其特征在于，所述標準陽性模板為對應含有基因eaeA，aggR，ipaH，lt和stxl的不同菌液等比混合得到的多重PCR反應模板；所述聚合酶為rTaq酶。4.用于多種致腹瀉大腸埃希菌的分型檢測PCR試劑盒中的引物對，為以下所述五種引物對順序按摩爾數10～15∶15～20∶1∶15～25∶20～30比例混合的引物混合物：1)特異于基因eaeA引物對：其中一個序列是：AACATTATGGAACGGCAGAGGT；另一個序列是：GTAAAGCGGGAGTCAATGTAACG；2)特異于基因aggR引物對：其中一個的序列是：GCTGATGCTGACGATTCTGTATT；另一個的序列是：TCCTTCTCGATTGTGTTTCTGAC；3)特異于基因ipaH引物對：其中一個的序列是：GCGCTCACATGGAACAATCTC；另一個的序列是：TCACTCCCGACACGCCATAG；4)特異于基因lt引物對：其中一個的序列是：GCATAATGAGTACTTCGATAGAGGA；另一個的序列是：TCACACCAAAATTAACACGATACC；5)特異于基因stxl引物對：其中一個的序列是：CATTCGTTGACTACTTCTTATCTGG；另一個的序列是：TAGGTACAATTCTGGCAACTCG。