本發(fā)明公開了microRNA——miR-3126-5p作為肝癌診斷標(biāo)志物的應(yīng)用。本發(fā)明利用高通量芯片檢測不同進(jìn)展期肝癌細(xì)胞和臨床肝癌血清標(biāo)本中microRNA的表達(dá)，從中篩選出候選microRNA，隨后通過檢測大樣本血清中候選microRNA的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)miR-3126-5p對于診斷肝癌具有較好的靈敏度和特異性，尤其在診斷早期肝癌、AFP低表達(dá)的肝癌中具有較好的診斷價值。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明開發(fā)了檢測miR-3126-5p的引物、試劑盒及檢測方法，具有較好的開發(fā)前景和臨床應(yīng)用價值。引物序列如SEQ？ID？NO.2所示，試劑盒由microRNA抽提試劑、反轉(zhuǎn)錄試劑、特異性擴(kuò)增引物以及PCR擴(kuò)增所需試劑組成。

1.miR-3126-5p的檢測試劑在制備早期原發(fā)性肝癌和低甲胎蛋白分泌的原發(fā)性肝癌的診
斷試劑中的應(yīng)用，所述miR-3126-5p的序列如SEQIDNO.1所示。
2.一種用于檢測血清miR-3126-5p的特異性擴(kuò)增引物，其特征在于：序列為：
TGAGGGACAGATGCCAGAAGCA,如SEQIDNO.2所示。
3.一種用于診斷肝癌的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒由特異性擴(kuò)增引物以及PCR擴(kuò)
增所需試劑組成；其中，特異性擴(kuò)增引物序列為：TGAGGGACAGATGCCAGAAGCA,如SEQ
IDNO.2所示，其特異性擴(kuò)增的目標(biāo)序列為miR-3126-5p；PCR擴(kuò)增所需試劑包括抽提和富集
血清中microRNA的試劑、對microRNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄的試劑以及對反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行特異性PCR擴(kuò)增
的試劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于診斷肝癌的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒的組成
為：2.5U/μlPolyA聚合酶20μl，逆轉(zhuǎn)錄酶20μl，5×逆轉(zhuǎn)錄緩沖液100μl，去RNA酶水1000μl，
2×qPCR混合液2000μl，50μM上游特異引物20μl，50μM下游適配引物20μl，內(nèi)參上游引物
20μl，內(nèi)參下游引物20μl，血清裂解液100ml，70％乙醇100ml，氯仿100ml，吸附柱20個，漂
洗液100ml，無水乙醇100ml；
所述上游特異引物為權(quán)利要求2所述的特異性擴(kuò)增引物。