本發(fā)明公開了一種W2000蘑菇呼吸袋栽培種液體原種的優(yōu)化配方及制備工藝。本發(fā)明液體原種培養(yǎng)基采用以下配方：玉米淀粉38-48g/L，黃豆粉10-15g/L，KHPO 2.5-3.5g/L，MgSO·7HO 0.8-1.2g/L，適宜培養(yǎng)條件為發(fā)酵溫度 22-25℃，搖瓶轉(zhuǎn)速180-220 r/min，初始pH 6.3-6.6，發(fā)酵時間6.5-7.5d；W2000液體原種制備工藝包括：母液培養(yǎng)基配制→PDA母種接入→振蕩培養(yǎng)→制成W2000母液菌種→液體原種培養(yǎng)基配制→接入母液→振蕩培養(yǎng)→制成W2000液體原種，可代替固體原種接入蘑菇呼吸袋栽培種基質(zhì)生產(chǎn)W2000栽培種。本發(fā)明制作W2000液體原種具有培養(yǎng)周期短、成本低、活力強(qiáng)、菌齡一致等優(yōu)點。

1.?一種W2000?蘑菇呼吸袋栽培種液體原種的制備工藝，其特征在于：具體步驟如下：1）、W2000?母液制備：a、母液培養(yǎng)基制備；b、在無菌條件下，取W2000?母種PDA?斜面上的0.5cm×0.5cm?大小菌塊接入母液培養(yǎng)基中，25℃靜置培養(yǎng)2d?；c、180r/min?回旋振蕩器發(fā)酵培養(yǎng)12d，完成W2000?母液菌種的制備；2)、W2000?液體原種制備：a、按每升液體原種培養(yǎng)基稱取玉米淀粉38-48g，黃豆粉10-15g，KH2PO4?2.5-3.5g，MgSO4·7H2O?0.8-1.2g?；b、向黃豆粉加0.3L?的蒸餾水加熱至沸騰，20min?用四層紗布過濾，棄豆渣，黃豆粉濾液備用；c、向玉米淀粉加入0.3L?的蒸餾水，攪拌均勻，邊攪拌邊加熱至沸騰；d、將黃豆粉濾液和玉米淀粉液混合，添加2.5-3.5g?KH2PO4?和0.8-1.2g?MgSO4·7H2O，攪拌均勻，倒入1L?量筒中，用蒸餾水補(bǔ)足混合液至1L，即為液體原種培養(yǎng)基；e、用4mol/L?NaOH?堿液調(diào)節(jié)液體原種培養(yǎng)基酸堿度，使之初始pH?為6.3-6.6?；f、100mL?量筒量100mL?液體培養(yǎng)基倒入250mL?三角瓶中，瓶口塞硅膠塞；g、0.1Mpa，121℃高壓蒸汽滅菌20min?；h、液體原種培養(yǎng)基冷卻后置于超凈工作臺中紫外燈照射殺菌30min?；i、在無菌條件下，將10mL?的W2000?母液菌種接入液體原種培養(yǎng)基中；j、接種后置于22-25℃，180-220r/min?回旋振蕩器發(fā)酵培養(yǎng)6-7d。