本發明公開了一種雙孢蘑菇菌種的液體發酵培養方法，包括：（1）取活化的0.5cm斜面母種接種到裝有60～120mL液體培養基的250mL培養瓶中，控溫21～27℃，90～180rpm振蕩培養5～7d得一級搖瓶菌種，按接種量為5～10%轉接一級種子到二級培養液進行培養，再將培養好的二級搖瓶液體菌種轉接到三級液體培養液進行培養，相同方法依次進行各級培養得種子液；（2）將種子液按5%的接種量接種至裝有6L發酵培養基的10L發酵罐進行發酵培養，25℃培養5～6d即可。該方法生產周期短、菌齡一致、生產成本低、接種簡便，一支試管種通過五級種培養就可以放大200000倍，液體二級菌種生長速度明顯優于固體傳統栽培種，速度提高了33%，同時，液體種各級之間的生長速度并沒有太大差異，平均滿瓶時間是27.5d，完全可以在工廠生產中實際應用。

1.一種雙孢蘑菇菌種的液體發酵培養方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）取活化的0.5cm²斜面母種接種到裝有60～120mL液體培養基的250mL培養瓶中，控溫
21～27℃，90～180rpm振蕩培養5～7d得一級搖瓶菌種，按接種量為5～10%轉接一級種子到二
級培養液進行培養，再將培養好的二級搖瓶液體菌種轉接到三級液體培養液進行培養，相同
方法依次進行各級培養得種子液；其中，各級搖瓶培養條件相同：裝液量為90mL，控溫
25℃，150rpm振蕩培養5～6d，接種量為5%；液體培養基配方為：碳源，氮源10～20g，
KH₂PO₄1～3g，MgSO₄0.5～1.5g，VB₁10mg，水1000mL，pH5～7；碳源為20～30mL麥芽
汁；氮源為玉米粉；碳氮比為3:1或2.5:1.5；
其中，一級培養時，液體培養基配方為：麥芽汁30mL，玉米粉10g，KH₂PO₄1g，MgSO₄
0.5g，VB₁10mg，水1000mL，pH6.5；
二級培養時，液體培養基配方為：玉米粉10g，蛋白胨20g，KH₂PO₄1g，MgSO₄0.5g，
VB₁10mg，水1000mL，pH6.5；
（2）將步驟（1）所得的種子液按5%的接種量接種至裝有6L發酵培養基的10L發酵罐進行
發酵培養，25℃培養5～6d，即可；其中，發酵培養基配方為：麥麩30g，玉米粉10g，蛋白
胨1g，磷酸二氫鉀0.5g、硫酸鎂1g、VB₁10mg/L，水1000mL，pH6.5。