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宏基因組提取方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-24
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201210580611.9 
  • 技術(專利)名稱 宏基因組提取方法 
  • 項目單位 中國科學院北京基因組研究所
  • 發明人 任魯風,王緒敏,楚亞男,高靜,谷嵐,隋碩,康禹,徐力,袁麗娜,張奕杰,高占成,于軍 
  • 行業類別 中藥材獲取-非動植物采選
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 蔣玉洪
  • 發布時間 2022-01-24  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了宏基因組提取方法,所述方法利用探針雜交磁珠捕獲方式降低宿主宏基因組DNA樣品中宿主DNA。所述方法利用宿主DNA中的重復序列Alu序列及其兩端保守序列作為模板,設計單向或者雙向探針,其中每條探針的5’端以生物素修飾,使用包被有鏈霉親和素的磁珠捕獲與探針雜交的宿主DNA,以達到減弱宏基因組中宿主DNA背景、提高測序數據有效率的目的。
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  • 02

    說明書

    1.一種宏基因組提取方法,其特征在于,利用探針雜交磁珠捕獲方式降低宿主宏基因組DNA樣品中宿主DNA的影響;所述探針與所述宿主基因組DNA樣品雜交后與所述磁珠偶聯,具體步驟如下:1)將標記有生物素的所述探針與提取的所述宿主宏基因組DNA樣品進行雜交;2)用包被有鏈霉親和素的所述磁珠捕獲探針與所述宿主DNA的復合體,并用磁力架分離磁珠-探針-目標DNA復合物;3)將去除所述磁珠-探針-目標DNA復合物的雜交液以及雜交后的磁珠清洗液進行純化回收DNA;探針5’端修飾有生物素;所述探針選自序列表中的序列SEQ?ID?NO:1至序列SEQ?ID?NO:139。2.一種宏基因組提取方法,其特征在于,利用探針雜交磁珠捕獲方式降低宿主宏基因組DNA樣品中宿主DNA的影響;所述探針與所述磁珠偶聯后與所述宿主基因組的雜交;具體步驟如下:1)利用包被有鏈霉親和素的所述磁珠與標記生物素的所述探針偶聯;2)將偶聯好的復合物與所述宿主宏基因組DNA樣品雜交;3)去除磁珠-探針-目標DNA復合物,對雜交液和雜交清洗液進行純化回收DNA;探針5’端修飾有生物素;所述探針選自序列表中的序列SEQ?ID?NO:1至序列SEQ?ID?NO:139。3.根據權利要求1~2的任一項所述的宏基因組提取方法,其特征在于雜交完成之后,對所述磁珠-探針-目標DNA復合物進行加熱或者氫氧化鈉法變性,回收偶聯有探針的磁珠。4.根據權利要求1~2的任一項所述的宏基因組提取方法,其特征在于所述宿主宏基因組DNA樣品取自人呼吸道、口腔、消化道、皮膚或生殖道。
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專利技術附圖

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