本發(fā)明提供了一種脂肪酶在拆分2?溴代異戊酸乙酯中的應(yīng)用，所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其編碼基因如SEQ ID NO.2所示。本發(fā)明脂肪酶基因可與表達(dá)載體連接構(gòu)建得到含該基因的胞內(nèi)表達(dá)重組質(zhì)粒，再轉(zhuǎn)化至大腸桿菌菌株中，獲得重組大腸桿菌；該重組大腸桿菌經(jīng)細(xì)胞破碎，分離純化獲得重組脂肪酶；該重組脂肪酶具有催化拆分外消旋2?溴代異戊酸乙酯的能力，可以得到產(chǎn)物(R)?2?溴代異戊酸乙酯，對(duì)映體過(guò)量值>99％和轉(zhuǎn)化率達(dá)到50.8％，產(chǎn)物(R)?2?溴代異戊酸乙酯的質(zhì)量收率達(dá)到96.4％，而且拆分效率高。

1.一種脂肪酶在拆分外消旋2-溴代異戊酸乙酯中的應(yīng)用，其特征在于所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述脂肪酶的編碼基因的核苷酸序列如SEQID NO.2所示。3.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述應(yīng)用為：以含脂肪酶編碼基因的工程菌經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)獲得的濕菌體凍干后的脂肪酶粗酶粉為生物催化劑，以外消旋2-溴代異戊酸乙酯為底物，以pH7.0緩沖液為反應(yīng)介質(zhì)，在20-45℃、800-1000rpm條件下進(jìn)行拆分反應(yīng)，反應(yīng)完全后，將反應(yīng)液分離純化，獲得(R)-2-溴代異戊酸乙酯。4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述催化劑用量以緩沖液體積計(jì)為15-30g/L，所述底物終濃度以緩沖液體積計(jì)為5-10g/L。5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于反應(yīng)時(shí)間為3-7h。6.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述反應(yīng)條件為35℃、1000rpm反應(yīng)5h。7.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述緩沖液為pH 7.0，0.2mM的Na₂HPO₄/NaH₂PO₄緩沖溶液。8.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述催化劑按如下方法制備：將含脂肪酶編碼基因的工程菌接種在LB培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)OD₆₀₀至0.4-0.6，加IPTG至終濃度0.02mM，30℃培養(yǎng)10-12h，菌液8000rpm，4℃離心10min，收集菌體，再用PBS緩沖液洗滌菌體2次，8000rpm，4℃離心10min，收集菌體，凍干得到脂肪酶粗酶粉。9.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述反應(yīng)液分離純化的方法為：反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用4mM HCl酸化至pH 2.0，然后用等體積乙酸乙酯萃取，分液漏斗分離出有機(jī)相，再經(jīng)純水洗滌兩次，飽和NaCl洗滌兩次，干燥，旋蒸，得到最終產(chǎn)物(R)-2-溴代異戊酸乙酯。