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一種含四元環的海松烷二萜類化合物及其抗腫瘤用途

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-02-15
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201711267134.X 
  • 技術(專利)名稱 一種含四元環的海松烷二萜類化合物及其抗腫瘤用途 
  • 項目單位 中國人民解放軍第二軍醫大學
  • 發明人 于豪冰,張藝馨,劉小宇,盧小玲,王曉麗,焦炳華 
  • 行業類別 醫藥制造-化學藥品制劑
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 王華梅
  • 發布時間 2022-02-15  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及醫藥技術領域,具體是一種從北極土壤彎孢聚殼菌D?1(Eutypella sp.D?1)中經提取、分離純化得到一類罕見含有四元環駢合海松烷母核的二萜類化合物,其化學結構如下所示。本發明的化合物經體外活性試驗證明,對人宮頸癌細胞Hela,人乳腺癌細胞MCF?7,人結腸癌細胞HCT?116,人慢性白血病細胞K562,人胰腺癌細胞SW1990等多種不同的腫瘤細胞均有一定的抑制活性,可用于制備抗腫瘤藥物。
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  • 02

    說明書

    1.一種含四元環的海松烷二萜類化合物,其化學結構如下所示: 2.一種如權利要求1所述的含四元環的海松烷二萜類化合物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:(A)制備總提物:a)從平板上挑取少量保藏編號為CCTCC NO:M 2013144的彎孢聚殼菌D-1的菌株的菌絲體,接種到250mL三角瓶中進行種子培養,每個三角瓶裝100mL的種子培養基,28℃搖床恒溫培養,轉速180r/min,培養3.5天獲得一級種子液,按照5v/v%接種量接入相同種子培養基,于28℃、180r/min搖床培養3.5d,獲得新鮮二級種子液,用于發酵培養;然后將種子培養液接種到2000mL的錐形瓶中進行擴大培養,在裝液量為400mL發酵培養基的錐形瓶中按照5v/v%的接種量接入新鮮種子液,置于20℃、180r/min搖床培養10d;當發酵培養至72h、96h、120h時,等量添加乙醇,添加終濃度為4%;所述的種子培養基配方為:葡萄糖125g/L,硝酸鈉3.3g/L,三水磷酸氫二鉀0.07g/L,七水硫酸鎂0.4g/L,氯化鉀0.625g/L,酵母提取物0.7g/L,六水氯化鈷3.125mg/L,硫酸亞鐵18.75mg/L,無水氯化鈣6.5g/L,L-鳥氨酸鹽酸鹽15g/L;所述的發酵培養基配方為:蔗糖51.4g/L,硝酸鈉3.3g/L,尿素2.5g/L,酵母提取物0.7g/L,三水磷酸氫二鉀0.07g/L,七水硫酸鎂0.4g/L,氯化鉀0.625g/L,七水硫酸亞鐵18.75mg/L,無水氯化鈣6.5g/L,六水氯化鈷3.125mg/L;b)將步驟a)中培養得到的菌液過濾,分別獲得菌體和菌液,菌液用等體積乙酸乙酯萃取3次,合并萃取液蒸干溶劑,將菌絲體用二氯甲烷:甲醇=1:1超聲提取3次,30min/次,濃縮提取液至無有機溶劑,加水混懸,用等體積乙酸乙酯萃取3次,最后合并菌液、菌體所得浸膏,得總提取物;(B)分離純化:a’)將乙酸乙酯粗提物經減壓液相柱色譜,以石油醚:乙酸乙酯=60:1,50:1,40:1,30:1,20:1,15:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1為溶劑進行梯度洗脫,根據TLC薄層層析顯色合并相似流分,得到12個組分Fr.A–L;b’)對組分Fr.E進行反相中壓液相色譜,進行梯度洗脫,條件為55%–100%甲醇/水,流速20mL/min,洗脫4h,合并同一峰型下的流分,得到13個組分Fr.E1–E13;對組分Fr.E9進行正相硅膠柱色譜,最后經反相高效液相,條件為65%乙腈/水,流速2mL/min,檢測波長為306nm,保留時間為54.0分鐘,即得Eutypellenone B;c’)對組分Fr.G進行反相中壓液相色譜,進行梯度洗脫,條件為50%–100%甲醇/水,流速10mL/min,洗脫4h,合并同一峰型下的流分,得到13個組分Fr.G1–G13;對組分Fr.G11進行正相硅膠柱色譜,最后經反相高效液相,條件為65%乙腈/水,流速2mL/min,檢測波長為302nm,保留時間為34.9分鐘,即得Eutypellenone A。3.一種如權利要求1所述的含四元環的海松烷二萜類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。4.根據權利要求3所述的含四元環的海松烷二萜類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用,其特征在于,所述的腫瘤為宮頸癌、乳腺癌、結腸癌、慢性白血病、胰腺癌。
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