本發(fā)明屬于中藥提取物的制備技術(shù)領(lǐng)域，具體公開(kāi)了一種洋蔥活性多肽提取物的制備方法及應(yīng)用。本發(fā)明制備方法的具體步驟包括：紫皮洋蔥用酸溶醇沉法分離提取、冷凍干燥后獲得洋蔥蛋白凍干粉，依次加入酸性蛋白酶、胃蛋白酶酶解，離心取上清液，稀釋后用凝膠層析分離，收集分子量3000?1000 D的組分，冷凍干燥即得洋蔥活性多肽凍干粉。本發(fā)明采用復(fù)合酶酶解和凝膠色譜方法制備洋蔥活性多肽，具有條件溫和、安全性高、成本低廉、產(chǎn)物易分離、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)；所制備的洋蔥活性多肽具有明顯的口服降糖、降脂作用，可以用于制備預(yù)防或治療糖尿病、高血脂的藥物或保健食品及食品。

1.一種洋蔥活性多肽提取物的制備方法，步驟如下：
（1）取洋蔥，切丁、勻漿，加入洋蔥重量1-3倍的0.2 mol/L pH 5.0-7.0的磷酸鹽緩沖液
浸泡，置于4℃冰箱12小時(shí)后，冷凍離心，上層即為洋蔥蛋白粗提液；
（2）向步驟（1）所得洋蔥蛋白粗提液中緩慢加入其1/3-1倍體積的95 v/v %乙醇，然后
用0.6 w/w %NaOH溶液調(diào)節(jié)pH 至8.0，冰浴中靜置過(guò)夜后，冷凍離心，收集沉淀，冷凍干燥即
得洋蔥蛋白凍干粉；
（3）向步驟（2）所得洋蔥蛋白凍干粉中加入6-8倍重量的蒸餾水稀釋，然后用0.1 mol/L
HCl調(diào)節(jié)pH至3.5；
（4）向步驟（3）所得溶液中按酶底比1:（8-12）加入酸性蛋白酶，在55℃下酶解1-3小時(shí)，
滅酶，冷卻至室溫；
步驟（4）中所述酶底比為酸性蛋白酶與步驟（2）所得洋蔥蛋白凍干粉的質(zhì)量比；
所述酸性蛋白酶的活力為50000 u/g；
（5）用0.1 mol/L HCl調(diào)節(jié)步驟（4）所得溶液pH至1.5，按酶底比1:（50-70）加入胃蛋白
酶，在37℃下酶解1-3小時(shí)，滅酶，冷卻至室溫，4℃、20000轉(zhuǎn)/分鐘離心30 分鐘，收集上清
液；
步驟（5）中所述酶底比為胃蛋白酶與步驟（2）所得洋蔥蛋白凍干粉的質(zhì)量比；
所述胃蛋白酶的活力為3000 u/mg；
（6）將步驟（5）收集的上清液用蒸餾水稀釋至為含多肽3-7 mg/mL的溶液，用葡聚糖凝
膠層析分離，收集分子量1000-3000 D的組分，冷凍干燥，即得到洋蔥活性多肽提取物凍干
粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（1）中，所述洋蔥為紫皮洋蔥；所
述磷酸鹽緩沖液pH為6.0；所述磷酸鹽緩沖液用量為洋蔥重量的2倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（2）中，所述95 v/v %乙醇用量為
洋蔥蛋白粗提液體積的0.5倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（3）中，所述蒸餾水用量為洋蔥蛋
白凍干粉重量的7倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（4）中，所述酶底比為1:10；所述
酶解時(shí)間為2小時(shí)；所述滅酶條件為95℃、15分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（5）中，所述酶底比為1:60；所述
酶解時(shí)間為2小時(shí)；所述滅酶條件為95℃、15分鐘。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（6）中，將步驟（5）收集的上清液
用蒸餾水稀釋至為含多肽5 mg/mL的溶液，葡聚糖凝膠層析的分離條件為：凝膠色譜柱為
Superdex Peptide 10/300GL，流動(dòng)相為0.2 mol/L的pH 7.4磷酸鹽緩沖液，流速0.5 mL/
min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一所述的制備方法制得的洋蔥活性多肽提取物在制備具有口
服降糖和/或降脂作用的藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一所述的制備方法制得的洋蔥活性多肽提取物在制備具有口
服降糖和/或降脂作用的食品中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一所述的制備方法制得的洋蔥活性多肽提取物在制備具有
口服降糖和/或降脂作用的保健食品中的應(yīng)用。