1.疫苗凍干保護劑，其特征在于，該保護劑中各成分及其終濃度為：海藻
糖50～100g/l、谷氨酸鈉5～15g/l、尿素2～8g/l、L-精氨酸2g/l、199培養基
9.9g/l，該保護劑中不含有明膠、人血白蛋白和右旋糖酐。
2.根據權利要求1所述的疫苗凍干保護劑，其特征在于，該保護劑通過以
下方法制備：按照海藻糖50～100g/l、谷氨酸鈉5～15g/l、尿素2～8g/l、L-
精氨酸2g/l、199培養基9.9g/l的比例稱取各物質，充分溶解于適量滅菌注射用
水后，定容，采用1N鹽酸調節PH值至7.2～7.4，除菌過濾，即得；置于2～
8℃條件保存備用，有效期12個月。
3.根據權利要求1所述的疫苗凍干保護劑，其特征在于，所述海藻糖的終
濃度為75g/l。
4.根據權利要求1所述的疫苗凍干保護劑，其特征在于，所述谷氨酸鈉的
終濃度為10g/l。
5.根據權利要求1所述的疫苗凍干保護劑，其特征在于，所述尿素的終濃
度為5g/l。
6.凍干水痘減毒活疫苗，其特征在于，它是由凍干水痘減毒活疫苗原液、
權利要求1-5任意一項所述的疫苗凍干保護劑制備而成。
7.制備權利要求6所述的凍干水痘減毒活疫苗的方法，其特征在于，該方
法包括以下步驟：
(1)毒種采用Oka株水痘病毒，培養基質采用2BS株人胚肺二倍體細胞；
(2)采用2BS細胞培養液對2BS株人胚肺二倍體細胞進行連續傳代，培
養溫度37℃，培養擴增至不超過41代；所述2BS細胞培養液為PH值7.2～7.3、
含12～18％小牛血清的MEM生長液；
(3)直接感染法：待2BS株人胚肺二倍體細胞生長至豐滿單層后，在原
2BS細胞培養液中按0.05～0.1MOI直接加入Oka株水痘病毒感染2BS株人胚
肺二倍體細胞，同時加入碳酸氫鈉溶液調節PH值至7.2～7.3，置于36℃培養；
(4)感染后24小時，傾去2BS細胞培養液，用相當于二倍以上2BS細胞
培養液的Hank's液洗滌2BS株人胚肺二倍體細胞表面，以去除牛血清，并換以
不含有任何血清成分的無血清MEM維持液，置于36℃繼續培養；
(5)當2BS株人胚肺二倍體細胞病變程度達到+++以上時，傾去無血清
MEM維持液，采用0.03～0.05％的EDTA溶液消化2BS株人胚肺二倍體細胞，
在2～8℃下以3000rpm的轉速離心8～10分鐘，棄上清液，保留沉淀物，向沉
淀物中加入疫苗凍干保護劑重懸，收集含有水痘病毒的細胞，抽樣做無菌檢查
后，置于-70℃保存；
(6)將步驟(5)經無菌檢查合格的含有水痘病毒的細胞懸液合并，在2～
8℃下以30KHZ的超聲波頻率進行連續流超聲破碎，流速控制在1000～1500ml
/min，經澄清過濾后得凍干水痘減毒活疫苗原液，抽樣做原液檢定后，置于-70
℃保存；
(7)凍干水痘減毒活疫苗原液檢定合格后，根據病毒滴度加入與步驟(5)
中相同的疫苗凍干保護劑進行適度的稀釋，成為疫苗半成品，并立即分裝凍干，
即制成凍干水痘減毒活疫苗；
步驟(5)和步驟(7)中，所述疫苗凍干保護劑的各成分及其終濃度為：
海藻糖50～100g/l、谷氨酸鈉5～15g/l、尿素2～8g/l、L-精氨酸2g/l、199培
養基9.9g/l，該保護劑中不含有明膠、人血白蛋白和右旋糖酐。
8.根據權利要求7所述的制備凍干水痘減毒活疫苗的方法，其特征在于，
步驟(4)中，所述不含有任何血清成分的無血清MEM維持液中各成分及其終
濃度為：谷氨酰胺0.3g/l、碳酸氫鈉2.4～3.2g/l、MEM培養基9.4g/l；按照比
例稱取以上物質，充分溶解于適量滅菌注射用水后，定容，除菌過濾，即得。
9.根據權利要求7所述的制備凍干水痘減毒活疫苗的方法，其特征在于，
步驟(7)中，所述凍干采用低溫真空冷凍干燥法，半成品分裝、裝箱結束后，
冷凍干燥箱預冷凍至-45～-50℃，使制品溫度達到-40℃以下保持至少2個小時，
開啟真空第一階段干燥即升華干燥，真空控制設定為5Pa±1Pa，導熱油溫度先
設定為-15℃，維持8個小時，之后導熱油溫度設定為-10℃，維持5個小時，當
產品溫度上升到導熱油出口溫度且凍干箱和凝結器的壓力接近并維持不變時，
在此基礎上再維持1小時，以徹底去除制品中的冰晶，之后進入第二階段干燥
即解析干燥，導熱油初始溫度設定為45℃，制品溫度控制在32～35℃，維持10
個小時后凍干結束，即制成凍干水痘減毒活疫苗。
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