本發(fā)明公開了一種完全利用木質(zhì)纖維素資源發(fā)酵制備富馬酸的方法。該工藝涉及通過兩步法降解木質(zhì)纖維素，將主要含有木糖的半纖維素降解液添加適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)物質(zhì)，用于產(chǎn)富馬酸霉菌種子培養(yǎng)18～42小時(shí)，第二步將主要含有葡萄糖的纖維素降解液添加適量營養(yǎng)物質(zhì)，作為發(fā)酵產(chǎn)酸培養(yǎng)基接種，接種上述種子液后培養(yǎng)60～96小時(shí)，高產(chǎn)富馬酸，其產(chǎn)量為28～56g/L，轉(zhuǎn)化率為41％～52％。本發(fā)明充分利用了原料木質(zhì)纖維素類物質(zhì)，來源更加廣泛，且不經(jīng)過分離提純，有效降低了生產(chǎn)成本，具備優(yōu)異的工業(yè)化應(yīng)用前景。

1.一種將木質(zhì)纖維素的降解液完全利用于根霉菌發(fā)酵生產(chǎn)富馬酸的方法，其特征在于：(1)首先降解木質(zhì)纖維素中的半纖維素得到木糖以供種子培養(yǎng)：配制種子培養(yǎng)基：稱量一定量的半纖維素降解液稀釋或濃縮成濃度為10～40g/L的木糖溶液，加入種子培養(yǎng)必需的營養(yǎng)物質(zhì)，配制成種子培養(yǎng)基，將種子培養(yǎng)基在115～121℃的高溫下滅菌15～30分鐘，冷卻；種子培養(yǎng)：按照1％～5％的接種量接入配置好的霉菌孢子懸浮液，置于溫度為30～35℃，培養(yǎng)18～42小時(shí)后的種子液備用以發(fā)酵產(chǎn)富馬酸；(2)再降解木質(zhì)纖維素中的纖維素得到葡萄糖以供發(fā)酵產(chǎn)富馬酸：配制發(fā)酵產(chǎn)酸培養(yǎng)基：將降解纖維素后得到的葡萄糖降解液濃縮至80～120g/L，加入霉菌種子液發(fā)酵產(chǎn)酸必需的營養(yǎng)物質(zhì)，配制成發(fā)酵產(chǎn)酸培養(yǎng)基，將發(fā)酵產(chǎn)酸培養(yǎng)基在115～121℃的高溫下滅菌15～30分鐘，冷卻；發(fā)酵產(chǎn)富馬酸：量取種子培養(yǎng)得到的種子液，按照10％～30％的接種量接入發(fā)酵產(chǎn)酸培養(yǎng)中，置于溫度為30～35℃，發(fā)酵培養(yǎng)60～96小時(shí)，得到富馬酸。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的配制種子培養(yǎng)基的步驟中加入的種子培養(yǎng)必需的營養(yǎng)物質(zhì)為(NH₄)₂SO₄1.5～3g/L，酵母膏0～4g/L，玉米漿0～5mL/L，KH₂PO₄0.1～1g/L，MgSO₄·7H₂O?0.1～1g/L，ZnSO₄·7H₂O?0.01～0.1g/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O?0.01～0.1g/L，瓊脂0～3g/L，添加中和劑控制pH為4～6.5。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所添加的中和劑為H₂SO₄或HCl。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的配制發(fā)酵產(chǎn)酸培養(yǎng)基的步驟中加入的發(fā)酵產(chǎn)酸培養(yǎng)基所需要的營養(yǎng)物質(zhì)為(NH₄)₂SO₄0～3g/L，酵母膏0～1g/L，KH₂PO₄0.1～1.0g/L，MgSO₄·7H₂O?0.1～1.0g/L，ZnSO₄·7H₂O?0.01～0.1g/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O0.01～0.1g/L，通過向培養(yǎng)基中添加中和劑控制pH為3.0～6.0。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所添加的中和劑為CaCO₃、Ca(OH)₂、NaOH或NaHCO₃。