本發明提供一種生物轉化改善再造煙葉感官品質的方法，包括如下步驟：(1)菌株活化：將食甲醇芽孢桿菌(VJ4?1)接種到斜面培養基上，再接種到種子培養基，轉接制得種子培養液；(2)復合生物轉化預處理：在再造煙葉的萃取工序，將步驟1)所述的種子培養液接種到再造煙葉水溶液中，并添加桔青霉阿魏酸酯酶、木聚糖酶、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶、酚氧化酶等復合酶，攪拌混合均勻，發酵得到再造煙葉生物轉化液；(3)經再造煙葉常規工序生產再造煙葉，在此過程中，溫度超過75℃，本發明的酶和菌失活，卷制得到再造煙葉。本發明生產的生物技術提升香氣品質的再造煙葉，降低刺激性、減少青雜氣、香氣優美、略帶奶香氣，改善再造煙葉感官品質。

1.一種生物轉化改善再造煙葉感官品質的方法，其特征在于包括如下步驟：
(1)菌株活化：將食甲醇芽孢桿菌Bacillus methylotrophicus(VJ4-1)接種到馬鈴薯
葡萄糖瓊脂斜面培養基上，在25～38℃、pH5～8條件下，靜置培養24～96h后得到斜面培養
物，再接種到種子培養基，在25～38℃，轉速100～150rpm/min條件下振蕩培養12～36h，連
續轉接1～3次后制得種子培養液；
所述的食甲醇芽孢桿菌Bacillus methylotrophicus(VJ4-1)保藏號為CCTCC NO：
2012004，于2012年1月16日保藏于武漢大學中國典型培養物保藏中心；
所述的斜面培養基為：馬鈴薯浸液200mL/L，葡萄糖20g/L，瓊脂13g/L；所述的種子培養
基：麥芽糖50g/L，蛋白胨10g/L，氯化鈉5g/L；
(2)復合生物轉化預處理：在再造煙葉原料的萃取工序，將步驟1)所述的種子培養液按
質量比2～18％接種到再造煙葉原料水溶液中，并添加占再造煙葉原料質量比的0.15～
0.4％的桔青霉阿魏酸酯酶、木聚糖酶、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶、酚氧化酶復合酶，攪拌
混合均勻，在pH至4.5～6.0，在30～45℃條件下，發酵1～12小時，得到再造煙葉原料生物轉
化液；所述桔青霉阿魏酸酯酶、木聚糖酶、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶、酚氧化酶均為食品
級，酶活500u/g～10000u/g，分別占再造煙葉原料質量比的0.08％、0.08％、0.04％、
0.03％、0.02％；
(3)再造煙葉常規生產工序：所述步驟2)的再造煙葉原料生物轉化液，在55～65℃、pH
自然條件下萃取反應40～60min，碟螺離心分離液渣，將萃取液75～85℃下真空濃縮至固含
量40％，得到濃縮液，在此過程中，溫度超過75℃，所述桔青霉阿魏酸酯酶、木聚糖酶、葡萄
糖氧化酶、過氧化氫酶、酚氧化酶和所述食甲醇芽孢桿菌Bacillus methylotrophicus
(VJ4-1)失活；而殘渣則通過用干燥機實施100～120℃干燥處理，滅活酶和菌，制成質量比5
～15％水含量的煙草基片；將濃縮液噴涂到煙草基片上卷制成提升香氣品質的再造煙葉。