本發(fā)明提供一種檢測(cè)外周血中胰腺癌細(xì)胞的試劑盒，包括結(jié)合有胰腺癌抗體的磁珠及相應(yīng)緩沖試劑，該試劑盒采用磁珠分選，RT?PCR等分子生物學(xué)的方法檢測(cè)胰腺癌患者血液循環(huán)中的腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)活性，確定藥物治療靶點(diǎn)的基因，通過(guò)檢測(cè)EpCAM、KRT19和MUC16的表達(dá)水平，確定胰腺癌的發(fā)展及轉(zhuǎn)歸，對(duì)胰腺癌的個(gè)體化治療提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)證據(jù)。本發(fā)明提供的試劑盒檢測(cè)樣本量小，對(duì)患者傷害小，檢測(cè)靈敏度高，檢出率可達(dá)80％以上。

1.一種檢測(cè)外周血中胰腺癌細(xì)胞標(biāo)志物的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒由如下組分組成：結(jié)合有胰腺癌抗體的磁珠：結(jié)合有寡核苷酸Oligo(dT)的磁珠；緩沖液A；100-200mL緩沖液B：100-200mL；裂解/結(jié)合緩沖液150-250mL；10×緩沖液4.0-5.0mL；dNTPs，每種5mM 4.0-5.0mL逆轉(zhuǎn)錄酶，10000U/μL 2.0-3.0mLRNA酶抑制劑，40U/μL 0.4-0.6mL2×熱啟動(dòng)PCR混合液2-3mLRNase-free水1-2mL；胰腺癌腫瘤標(biāo)志物引物10μmol/L 3.0-5.0mL；內(nèi)標(biāo)ACTIN引物；其中所述胰腺癌腫瘤標(biāo)志物為EpCAM、KRT19和MUC16；所述EpCAM引物序列為：上游引物如SEQ ID NO：1所示；下游引物如SEQ ID NO：2所示；所述KRT19引物序列為：上游引物如SEQ ID NO：3所示；下游引物如SEQ ID NO：4所示；所述MUC16引物序列為：上游引物如SEQ ID NO：5所示；下游引物如SEQ ID NO：6所示；所述內(nèi)標(biāo)ACTIN引物序列為：上游引物如SEQ ID NO：7所示；下游引物如SEQ ID NO：8所示；所述胰腺癌抗體為抗EpCAM單克隆抗體和抗CK20單克隆抗體。2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述2×熱啟動(dòng)PCR混合液中包含HotStarTaq DNA Polymerase 5U/μL。3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述緩沖液A的配方為：10mM Tris-HCl,pH7.5；0.15M LiCl；1mM EDTA；0.1％LiDS。4.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述緩沖液B的配方為：10mM Tris-HCl,pH7.5；0.15M LiCl；1mM EDTA。