本發明涉及一種產霍亂毒素霍亂弧菌環介導等溫擴增快速檢測方法。其中的試劑包括環介導等溫擴增反應液、Bst DNA聚合酶、顯色劑；其中的反應液含有反應緩沖液、dNTP、硫酸鎂、上游內引物5-TGAATCCACGGCTCTTCCCT-TGGTTATGGATTGGCAGG-3、下游內引物5-GGTTGTGGGAATGCTCCAAG-ACTTTGGGTTTTTTCATCGC-3、上游外引物5-GATATTGCTCCAGCAGCA-3、下游外引物5-CGTCAAGGAATTTTACACCTAG-3和甜菜堿；檢測產霍亂毒素霍亂弧菌的方法包括細菌DNA的提取、產霍亂毒素霍亂弧菌的環介導等溫擴增、顯色檢測。本發明的優點是快速、特異性強、靈敏度高而且成本低。

1.環介導等溫擴增檢測產霍亂毒素霍亂弧菌的試劑，其特征是該試劑包括
(1)-(4)：
(1)環介導等溫擴增反應液：
包括10×Thermopol反應緩沖液、1.0-1.4mmol/L?dNTP、4-8mmol/L
硫酸鎂(MgSO4)、0.8-1.6μmol/L上游內引物(FIP)、0.8-1.6μmol/L
下游內引物(BIP)、0.2-0.3μmol/L上游外引物(F3)、0.2-0.3μmol/L
下游外引物(B3)和1-1.5mol/L甜菜堿；其中10×Thermopol反應緩沖
液含有200mmol/L?pH8.8的三羥基甲基氨基甲烷-鹽酸、100mmol/L氯
化鉀、100mmol/L硫酸銨、20mmol/L硫酸鎂和1％曲拉通X-100；
其中上游內引物：
5-TGAATCCACGGCTCTTCCCT-TGGTTATGGATTGGCAGG-3、
下游內引物：
5-GGTTGTGGGAATGCTCCAAG-ACTTTGGGTTTTTTCATCGC-3、
上游外引物：5-GATATTGCTCCAGCAGCA-3、
下游外引物：5-CGTCAAGGAATTTTACACCTAG-3、
(2)UNG酶：1U/μL；
(3)Bst?DNA聚合酶：8U/μL；
(4)顯色劑：為10％的熒光染料SYBR?GREEN?I或者DNAGreen。