福利一区二区三区视频在线观看-福利一区三区-福利一区视频-福利在线网址-妇女激情毛片-干干干操操操

您現在的位置: 首頁 > 技術轉讓 > 構建簡化基因組文庫的方法及試劑盒

構建簡化基因組文庫的方法及試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-23
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

專利推薦

  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201611193343.X 
  • 技術(專利)名稱 構建簡化基因組文庫的方法及試劑盒 
  • 項目單位 中國水稻研究所
  • 發明人 王克劍,劉慶 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 陳佳佳
  • 發布時間 2022-01-23  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供了一種構建簡化基因組文庫的方法及試劑盒。該方法包括:利用第一對引物對全基因組進行非特異性擴增,得到隨機擴增片段;利用第二對引物對隨機擴增片段進行特異性擴增,得到簡化基因組文庫。該方法利用非特異性擴增在基因組上存在隨機性的特點,無需高質量或高濃度的DNA,無需繁瑣的酶切建庫步驟,只需要對樣本DNA進行簡單的PCR反應,可以隨意選擇目標片段。通過簡單更改PCR退火溫度或引物序列就可以靈活控制目標片段在全基因組的覆蓋區域。該方法步驟簡捷易行、靈活度高、成本較低,而且測序結果準確性高。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種構建簡化基因組文庫的方法,其特征在于,所述方法包括:利用第一對引物對全基因組進行非特異性擴增,得到隨機擴增片段;利用第二對引物對所述隨機擴增片段進行特異性富集擴增,得到所述簡化基因組文庫;所述第一對引物的3’端具有一個或多個簡并堿基。2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,通過降低所述第一對引物的退火溫度的方式,對全基因組進行非特異性擴增,得到所述隨機擴增片段。3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述第一對引物沿5’至3’方向依次包括搭橋序列、可選的第一標簽序列以及非特異擴增序列,所述非特異擴增序列具有所述簡并堿基。4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述簡并堿基的數目隨所欲得到的所述隨機擴增片段的數目的增多而增多。5.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述第二對引物沿5’至3’方向依次包括測序接頭序列、測序引物序列以及所述搭橋序列。6.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述非特異擴增序列的長度為4~25bp。7.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述第一標簽序列的長度為1~20bp。8.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述搭橋序列的長度為15~30bp。9.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述第一對引物中的所述非特異擴增序列的來源選自水稻、玉米、大麥、小麥、擬南芥、人以及動物中的任意一種。10.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述第一對引物包括第一上游引物和第一下游引物,所述第一上游引物的通式為:CGACGCTCTTCCGATCTTGACGC(P)p(Q)q,所述第一下游引物的通式為:GTGTGCTCTTCCGATCTCAGTCC(P’)p’(Q’)q’;或者所述第一上游引物的通式為:CCTGCGTGTCTCCGACTCAG(P)p(Q)q,所述第一下游引物的通式為:CTATGGGCAGTCGGTGAT(P’)p’(Q’)q’;其中,SEQ ID NO:1:CGACGCTCTTCCGATCTTGACGC或者SEQ ID NO:23:CCTGCGTGTCTCCGACTCAG表示所述第一上游引物中的搭橋序列,(P)p表示所述第一上游引物中p個堿基P形成的所述第一標簽序列,P選自A、T、C或G,1≤p≤20,(Q)q表示所述第一上游引物中q個堿基Q形成的非特異性擴增序列,Q選自A、T、C、G、R、Y、M、K、S、W、H、B、V、D或N,4≤q≤25;SEQ ID NO:2:GTGTGCTCTTCCGATCTCAGTCC或者SEQ ID NO:24:CTATGGGCAGTCGGTGAT表示所述第一下游引物中的搭橋序列,(P’)p’表示所述第一下游引物中p’個堿基P’形成的所述第一標簽序列,P’選自A、T、C或G,1≤p’≤20,(Q’)q’表示所述第一下游引物中q’個堿基Q’形成的非特異性擴增序列,Q’選自A、T、C、G、R、Y、M、K、S、W、H、B、V、D或N,4≤q’≤25。11.一種構建簡化基因組文庫的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括對全基因組進行非特異性擴增的第一對引物和對所述第一對引物的擴增產物進行特異性擴增的第二對引物;所述對全基因組進行非特異性擴增的第一對引物的3’端具有一個或多個簡并堿基。12.根據權利要求11所述的試劑盒,其特征在于,所述第一對引物沿5’至3’方向依次包括搭橋序列、可選的第一標簽序列以及非特異擴增序列。13.根據權利要求12所述的試劑盒,其特征在于,所述第二對引物沿5’至3’方向依次包括測序接頭序列、測序引物序列以及所述搭橋序列。14.根據權利要求12所述的試劑盒,其特征在于,所述非特異擴增序列的長度為4~25bp。15.根據權利要求12所述的試劑盒,其特征在于,所述第一標簽序列的長度為1~20bp。16.根據權利要求12所述的試劑盒,其特征在于,所述搭橋序列的長度為15~30bp。17.根據權利要求12所述的試劑盒,其特征在于,所述第一對引物中的非特異擴增序列的來源選自水稻、玉米、大麥、小麥、擬南芥、人以及動物中的任意一種。18.根據權利要求12所述的試劑盒,其特征在于,所述第一對引物包括第一上游引物和第一下游引物,所述第一上游引物的通式為:CGACGCTCTTCCGATCTTGACGC(P)p(Q)q,所述第一下游引物的通式為:GTGTGCTCTTCCGATCTCAGTCC(P’)p’(Q’)q’;或者所述第一上游引物的通式為:CCTGCGTGTCTCCGACTCAG(P)p(Q)q,所述第一下游引物的通式為:CTATGGGCAGTCGGTGAT(P’)p’(Q’)q’;其中,SEQ ID NO:1:CGACGCTCTTCCGATCTTGACGC或者SEQ ID NO:23:CCTGCGTGTCTCCGACTCAG表示所述第一上游引物中的搭橋序列,(P)p表示所述第一上游引物中p個堿基P形成的所述第一標簽序列,P選自A、T、C或G,1≤p≤20,(Q)q表示所述第一上游引物中q個堿基Q形成的非特異性擴增序列,Q選自A、T、C、G、R、Y、M、K、S、W、H、B、V、D或N,4≤q≤25;SEQ ID NO:2:GTGTGCTCTTCCGATCTCAGTCC或者SEQ ID NO:24:CTATGGGCAGTCGGTGAT表示所述第一下游引物中的搭橋序列,(P’)p’表示所述第一下游引物中p’個堿基P’形成的所述第一標簽序列,P’選自A、T、C或G,1≤p’≤20,(Q’)q’表示所述第一下游引物中q’個堿基Q’形成的非特異性擴增序列,Q’選自A、T、C、G、R、Y、M、K、S、W、H、B、V、D或N,4≤q’≤25。
    展開

專利技術附圖

服務流程

過戶資料

  • 買賣雙方需提供資料
  • 平臺提供
  • 過戶后您將獲得
  • 買家
  • 賣家
  • 公司
  • 企業營業執照
  • 企業營業執照

    專利注冊證原件

  • 個人
  • 身份證

    個體戶營業執照

  • 身份證

    專利注冊證原件

  • 專利代理委托書

    轉讓申請書

    轉讓協議

  • 手續合格通知書

    專利證書

    專利利登記簿副本

安全保障

  • 品類齊全

    海量資源庫,平臺整合幾十萬閑置資源。
  • 交易保障

    完善的資金保障體系確保買賣雙方資金安全。
  • 專人跟進

    專業交易顧問全程服跟進,確保交易流暢。
  • 快速響應

    專業在線/電話客服服務,快速響應貼心服務。
  • 售后無憂

    資質過硬,國內大知識產權服務平臺。
  • -我要咨詢-
  • ×
聯系人:
專利名稱: *
聯系電話: *
驗證碼:

提交

關于我們 | 聯系我們

傳真:0435-3213171 電話:18801213919 郵箱:[email protected] 地址:吉林省通化市東昌區新華大街1003號(通化市科技成果轉化中心)


舉報電話:0435-5112631     舉報郵箱:[email protected]

備案號ICP備18003140號-1
主站蜘蛛池模板: 亚洲一区AV在线观看红楼梦 | 无码国产一区二区三区久久网 | 国产乱码精品一区二区三区久久 | 日韩人妻少妇一区二区三区 | 日韩精品欧美激情亚洲综合 | 成人激情五月天 | 国产欧美一区二区精品蜜桃 | 亚洲午夜精品在线视频 | 国产欧美日韩精品一区二区被窝 | 国产av永久无码天堂影院 | 国产成人精品免高潮在线观看 | 18国产精品白浆在线观看免费 | 爆乳熟妇一区二区三区影院挤奶 | 成人va在线一区二区三区四区 | av中文字幕网免费观看 | av无码一区二区三区人 | 国产人妻大保健私密推油按摩无码 | 人妻超级精品碰碰在线97视频 | 波多野结衣精品一区二区三区 | 99久久国产综合精品五月天 | 秋霞无码久久一区二区 | 自拍亚洲中文字幕一区二区 | 国产av亚洲精品久久久久久 | 亚洲性爱视频 | 日日噜噜大屁股熟妇AV张柏芝 | 99久久精品免费看国产情侣 | 阿v天堂在线2024 | 日本最新乱伦视频 | 在线视频国偷自产 | 91精品国产福利在线导航 | 日本正能量不良网站 | 丁香婷婷五月情天 | 伊人的天堂 | 精品欧美日韩一区二区三区 | 日韩精品高清在线 | 国产精品ⅴa在线观看 | 久久久无码国产精品AAA | 国产精品一品道加勒比 | 国产三级片在线视频观看 | 91精品国产综合久久精品 | a级毛片无码无遮挡 |