本發明公開了一種轉基因油菜GT73的快速檢測方法。其原理是采用5條特異引物及一種具有鏈置換活性的DNA聚合酶，在63～65℃對樣品DNA模板進行擴增，短時間擴增出大量產物。其鑒定采用肉眼直接觀察反應管內沉淀的濁度或者通過加入SYBR Green顏色變化判斷擴增與否。本發明的檢測方法具有高特異性、高效性、快速、簡便等優點。

1.用于檢測轉基因油菜GT73的特異性引物，其特征在于，由外引物正向序列：5’-GGTAATTACTCTTTCTTTTTCTCC-3’，外引物反向序列：5’-GTGGAATGTTCAATACCTTGA-3’；內引物正向序列：5’-GGAGGATGATCTTCATGTCCGGTTTTATATTGACCATCATACTCATTGC-3’，內引物反向序列5’-GCCTTTCCTTCCTTTTCTTGCCTTTTTGTTTCTGAGTAATTCTTCAGC-3’和環引物序列：5‘-AAGCTTGTGTCAATTGTTGACAGAG-3’組成。2.一種采用權利要求1所述特異性引物快速檢測轉基因油菜GT73方法，其特征在于包括如下步驟：(1)將引物混合溶液及一種具有鏈置換活性的DNA聚合酶，加入模板DNA，在63-65℃進行45-60min，并且在80℃持續2min，4℃保存；其中的擴增反應體系：擴增反應的總體積為25μL，其各種成分分別為：10×ThermoPol?Buffer?2.5μL，4mol/L甜菜堿6.25μL，0.2mol/L?MgSO₄?0.25μL，引物混合液1μL，10μmol/L?dNTPs?3.5μL，8000U/L?BstDNA聚合酶大片段1-2μL，模板DNA?1-5μL，用滅菌去離子水補齊到25μL，混勻，離心4000-8000rpm，5-10秒后上機；(2)擴增反應結束，取體系液3-25μL，采用不同方法判斷擴增與否，包括：直接向擴增管中加入熒光染料SYBR?Green，通過顏色變化觀察有無擴增反應；或評估擴增副產物焦磷酸鎂白色沉淀物的量來觀察有無擴增反應；或通過觀察瓊脂糖凝膠電泳條帶判斷擴增結果。3.如權利要求2所述的檢測方法，其中所述的引物混合溶液指的是將權利要求1所述的5條特異引物粉末分別配成濃度為100μmol/L的母液，然后取外引物各1μL，內引物各8μL，加滅菌去離子水2μL，充分混合，制得引物混合溶液。?