本發(fā)明公開了一種紫花苜蓿高效組織培養(yǎng)再生方法，其依次包括有如下步驟：(1)無菌苗的培養(yǎng)；(2)將紫花苜蓿無菌苗葉片接種于愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)；(3)將愈傷組織轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基1中進(jìn)行培養(yǎng)；(4)將要長(zhǎng)出綠色芽點(diǎn)的愈傷組織轉(zhuǎn)入愈傷組織繼代培養(yǎng)基2中進(jìn)行繼代培養(yǎng)(5)挑選生長(zhǎng)狀態(tài)好的愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基中進(jìn)行分化培養(yǎng)；(6)待分化出苗后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：本發(fā)明通過添加合適劑量的TDZ和連續(xù)繼代實(shí)現(xiàn)了紫花苜蓿組織培養(yǎng)中植株的高效再生，應(yīng)用本發(fā)明方法可以提高紫花苜蓿愈傷組織分化率，比現(xiàn)有技術(shù)的分化率平均高出12.3％。該方法操作簡(jiǎn)單、植株再生成功率高。本發(fā)明為進(jìn)一步利用基因工程對(duì)其進(jìn)行遺傳改良奠定了基礎(chǔ)。

1.紫花苜蓿高效組織培養(yǎng)再生的方法，其依次包括有如下步驟：(1)無菌苗的培養(yǎng)；(2)
將紫花苜蓿無菌苗葉片接種于愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)；(3)將愈傷組織轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基1中進(jìn)
行培養(yǎng)；(5)挑選生長(zhǎng)狀態(tài)好的愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基中進(jìn)行分化培養(yǎng)；(6)待分化出苗后轉(zhuǎn)
入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)；其特征在于：在所述步驟(3)和步驟(5)之間增加步驟(4)，其中
步驟(4)是將步驟(3)經(jīng)愈傷組織轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基1中進(jìn)行培養(yǎng)后，即將要長(zhǎng)出綠色芽點(diǎn)的愈傷
組織轉(zhuǎn)入愈傷組織繼代培養(yǎng)基2中進(jìn)行繼代培養(yǎng)5-8天；其中所述愈傷組織繼代培養(yǎng)基2：
MS+0.01-0.5mg/L?TDZ+20g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂，PH值：5.8-6.0；愈傷組織繼代培養(yǎng)基1：
MSO+0.5mg/L?NAA+0.5mg/L?6-BA+1.0mg/L?AgNO₃+20g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂。