1.一種提高真菌產巴卡亭III產率的氧化環境發酵方法,其特征在于,包括以下步驟:在液體培養基中培養產巴卡廷III的紅豆杉內生菌,Diaporthe phaseolorum的菌株no.79,當真菌在培養基中培養一段時間后,第一次加入雙氧水,然后每隔3天添加一次雙氧水,直至發酵結束,得到真菌培養液,并對真菌培養液進行回收和提純;所述培養基為PDB培養基,其組成為:水1000ml、馬鈴薯600g、蔗糖280g、pH6.5-7.0;所述培養一段時間的具體時間長度是2天;所述第一次加入雙氧水的量為每1000ml培養基中加入30ml雙氧水;所述每隔三天加入雙氧水的量為每1000ml培養基中加入60ml雙氧水;所述的回收并提純的步驟包括:1)真菌培養液用濾紙過濾備用,菌絲體殘渣加入石英砂被充分研磨,研磨的后的殘渣在45℃條件下被充分干燥,然后稱重備用;2)將干燥稱重后的菌絲體粉末放入30ml體積比為1:1的氯仿/甲醇混合液,充分混勻為懸濁液,然后在超聲波震蕩30分鐘,過濾,將濾渣采用上述方法提??;3)合并兩次所得濾液并在40℃條件下低壓旋轉蒸發,然后將所的到的膏狀蒸發殘留物溶解在30ml氯仿中,然后用30ml的水再次抽提;4)收集有機相,并在旋轉蒸發器中40℃旋轉蒸發,所得干燥殘留物被溶解在5ml的甲醇中,并用0.45lm孔過濾器過濾備用;5)過濾后的真菌培養液在70℃條件下低真空旋轉蒸發;6)當液體剩余10ml時,加入30ml體積比為1:1的氯仿/甲醇混合液,然后使用和菌絲體相同的方法進行巴卡廷III的分離。
展開