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短雄花序板栗品種的分子育種方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-06-24
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201510568054.2 
  • 技術(專利)名稱 短雄花序板栗品種的分子育種方法 
  • 項目單位 北京市農林科學院
  • 發明人 胡廣隆,黃武剛,程麗莉,張杰偉,蘭彥平,曹慶昌 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 周焓
  • 發布時間 2021-06-24  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供一種短雄花序板栗品種的分子育種方法,包括:1)以‘黑山寨7號’作為母本,具有優異性狀的板栗種質資源作為父本,收集花粉對‘黑山寨7號’授粉;2)通過測序技術分析板栗基因在各雜交親本間的序列差異,基于差異序列構建各雜交親本的基因單倍型分子身份證;3)開發與板栗短雄花序性狀相關的分子標記;4)利用上述構建的基因單倍型分子身份證以及與板栗短雄花序性狀相關的分子標記,分別對F1代雜交苗進行篩選,從而獲得既具有短雄花序基因又具有優異種質材料背景的雜交苗。本發明通過分子標記輔助選擇與常規育種手段相結合的方式,實現在雜種F1代中快速聚合板栗短雄花序基因及其他優異基因的目的。
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  • 02

    說明書

    1.一種短雄花序板栗品種的分子育種方法,其特征在于,包括以下步驟:
    1)配置雜交組合:以板栗品種‘黑山寨7號’作為母本,選擇具有優異性狀的板栗種質資
    源作為父本,收集花粉對‘黑山寨7號’進行授粉,授粉過程中,無需對‘黑山寨7號’去雄及套
    袋,雜交獲得F1代;
    2)構建雜交親本的基因單倍型分子身份證:通過測序技術分析板栗MYB轉錄因子基因
    在各雜交親本間的序列差異,通過差異序列構建各雜交親本的基因單倍型分子身份證;
    3)開發與板栗短雄花序性狀相關的分子標記;
    4)雜交苗的分子標記篩選:利用上述構建的雜交親本的基因單倍型分子身份證以及開
    發的與板栗短雄花序性狀相關的分子標記,分別對F1代雜交苗進行分子標記篩選,從而篩
    選到既具有純合短雄花序基因又具有優異種質材料背景的雜交苗;
    其中,步驟3)中開發的與板栗短雄花序性狀相關的分子標記為SNP標記。
    2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述的優異性狀包括防寒、矮化、
    短枝、耐短截、防褐變、早熟、大果。
    3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟1)中將收集到的具有不同優異性狀的
    板栗種質資源的花粉混合,對‘黑山寨7號’進行開放式人工授粉。
    4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟2)中利用特異性PCR引物對I擴增各雜
    交親本的MYB轉錄因子基因,通過測序比較板栗MYB轉錄因子基因在各雜交親本間的序列差
    異;所述引物對I為:
    1F:5′-AGGAGAGGCAGCGTTGGAGA-3′
    1R:5′-GGTCTGCAGCCCATCTGCTCAA-3′。
    5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟3)中用于PCR擴增所述與板栗短雄花
    序性狀相關的分子標記的特異性引物對II為:
    2F:5′-ACTTAGGCATTTAGCCATGTTTGG-3′
    2R:5′-CTCCCACGACCACGGAAC-3′。
    6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于,步驟3)所述的SNP標記的核苷酸序列如SEQ
    ID No.1所示。
    7.根據權利要求1-6任一項所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述具有優異性狀的板
    栗種質資源包括葉里藏、毛板栗、信陽5號、拖桌早熟、孫家營7號、遵達、柞板栗、大油栗、毛
    蒲、留山10號、九龍早熟、高家早熟、燕魁、柞縣、中遲栗、暑處紅、確羅32號、團結早熟、特早
    熟、遵玉、節節紅、淺刺大板栗、青扎、光山2號、孫家營4號、宜良早熟、大板紅、固始4號、六月
    暴、紅栗、林謂2號、下村、下村1號、茅栗、羊毛栗、山東薄、七月紅、正義大毛栗、張莊子三號、
    軟刺早、大烏殼、山東紅光、垂2、水富毛栗、宜良大板栗、羅山、油板栗、山東無花、南山4號、
    永平早熟、板優3號子代、確山27號。
    8.根據權利要求7所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述具有優異性狀的板栗種質資
    源包括為特早熟、大油栗、固始4號。
    9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于,步驟2)中構建的雜交親本的基因單倍型分
    子身份證如下:
    父本為大油栗:5′-CGATAAGAACCGGGGAGGAGGAAGGGAA CAGTWRG-3′
    父本為特早熟:5′-TGACAAGAACCGGGGAGGAGGAAGGGRA CAGTTGG-3′
    父本為固始四號:5′-CRATAAGAACCGGGGAGGAGGAAGGGA ACAGTWGG-3′
    其中,W代表A或T,R代表A或G。
    10.與板栗短雄花序性狀相關的SNP分子標記,其特征在于,所述SNP分子標記的核苷酸
    序列如SEQ ID No.1所示。
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