本發(fā)明公開了干擾LCYB、LCYE表達(dá)同時(shí)異位表達(dá)TT8在制備花瓣呈紅色蕓薹屬植物中的應(yīng)用，還公開了干擾LCYB、LCYE基因表達(dá)同時(shí)異位表達(dá)TT8基因的制備表達(dá)載體和載體的制備方法，通過干擾LCYB、LCYE基因表達(dá)抑制黃色類胡蘿卜素并積累紅色番茄紅素，而異位表達(dá)TT8基因能夠促進(jìn)花青素苷積累，從而使花瓣呈紅色，成功制備了花瓣顯紅色的蕓薹屬植物，豐富了蕓薹屬植物的花色。

1.干擾蕓薹屬植物花瓣中β-環(huán)化酶基因LCYB、ε-環(huán)化酶基因LCYE表達(dá)同時(shí)異位表達(dá)
TT8基因在制備花瓣呈紅色的蕓薹屬植物品種中的應(yīng)用，其特征在于：干擾蕓薹屬植物花瓣
中β-環(huán)化酶基因LCYB、ε-環(huán)化酶基因LCYE表達(dá)的序列如SEQ ID NO.2所示，異位表達(dá)TT8基
因的序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：用于干擾蕓薹屬植物花瓣中β-環(huán)化酶基因
LCYB、ε-環(huán)化酶基因LCYE表達(dá)的序列由擬南芥花瓣特異啟動(dòng)子PAtAP3介導(dǎo)表達(dá)，所述花瓣
特異啟動(dòng)子PAtAP3的核苷酸序列如SEQ ID NO.1第267位至第1044位所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于：所述蕓薹屬植物為甘藍(lán)型油菜
（Brassica napus）。
4.干擾蕓薹屬植物花瓣中β-環(huán)化酶基因LCYB、ε-環(huán)化酶基因LCYE表達(dá)同時(shí)異位表達(dá)
TT8基因的植物表達(dá)載體，其特征在于：所述植物載體包括由花瓣特異啟動(dòng)子介導(dǎo)的表達(dá)β-
環(huán)化酶基因LCYB、ε-環(huán)化酶基因LCYERNA干擾序列的表達(dá)框和由組成型啟動(dòng)子介導(dǎo)異位表
達(dá)TT8基因的表達(dá)框；
所述花瓣特異啟動(dòng)子介導(dǎo)表達(dá)β-環(huán)化酶基因LCYB、ε-環(huán)化酶基因LCYE的RNA干擾序列
的表達(dá)框依次由花瓣特異啟動(dòng)子PAtAP3、SEQ ID NO.2所示的序列、間隔序列、SEQ ID NO.2
所示的序列的反向互補(bǔ)序列和OCS終止子組成；
所述由組成型啟動(dòng)子介導(dǎo)異位表達(dá)TT8基因的表達(dá)框依次由CaMV35S啟動(dòng)子，SEQ ID
NO.3所示序列和NOS終止子組成；
其制備方法如下：將SEQ ID NO.1所示序列經(jīng)Asc和Swa雙酶切后連入經(jīng)同樣酶切的
pFGC5941M質(zhì)粒，得pFGC5941CEPE質(zhì)粒，然后將SEQ ID NO.2所示的序列連入pFGC5941CEPE
載體的PAtAP3啟動(dòng)子與間隔序列之間，形成中間載體pFGC5941CEPE-B2RNAia，再將SEQ ID
NO.2所示序列反向連入中間載體pFGC5941CEPE-B2RNAia的間隔序列與OCS終止子之間，得
pFGC5941CEPE-B2RNAi載體，最后將SEQ ID NO.3所示序列通過Nco和Asc酶切位點(diǎn)連入經(jīng)
同樣酶切的pFGC5941CEPE-B2RNAi載體，得干擾蕓薹屬植物花瓣中β-環(huán)化酶基因LCYB、ε-環(huán)
化酶基因LCYE表達(dá)同時(shí)異位表達(dá)TT8基因的植物表達(dá)載體。
5.權(quán)利要求4所述植物表達(dá)載體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：將SEQ ID
NO.1所示序列經(jīng)Asc和Swa雙酶切后連入經(jīng)同樣酶切的pFGC5941M質(zhì)粒，得pFGC5941CEPE
質(zhì)粒，然后將SEQ ID NO.2所示的序列連入pFGC5941CEPE載體的PAtAP3啟動(dòng)子與間隔序列
之間，形成中間載體pFGC5941CEPE-B2RNAia，再將SEQ ID NO.2所示序列反向連入中間載體
pFGC5941CEPE-B2RNAia的間隔序列與OCS終止子之間，得pFGC5941CEPE-B2RNAi載體，最后
將SEQ ID NO.3所示序列通過Nco和Asc酶切位點(diǎn)連入經(jīng)同樣酶切的pFGC5941CEPE-
B2RNAi載體，得干擾蕓薹屬植物花瓣中β-環(huán)化酶基因LCYB、ε-環(huán)化酶基因LCYE表達(dá)同時(shí)異
位表達(dá)TT8基因的植物表達(dá)載體。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于：所述間隔序列為甘藍(lán)型油菜PAP2基因
第2內(nèi)含子。
7.利用權(quán)利要求4所述植物表達(dá)載體制備花瓣呈紅色的蕓薹屬植物品種的方法，其特
征在于，包括如下步驟：
a.將權(quán)利要求4所述植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌，制得工程菌；
b.將步驟a所得工程菌轉(zhuǎn)化蕓薹屬植物無菌苗的下胚軸，共培養(yǎng)后，在Basta除草劑抗
性下誘導(dǎo)分化獲得再生苗，篩選陽性苗轉(zhuǎn)基因苗得花瓣呈紅色的蕓薹屬植物品種。