本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)檢測和生化分析領(lǐng)域，具體公開了一種表面功能化的二氧化硅熒光納米粒子用于細(xì)胞內(nèi)外鋅離子檢測的新熒光探針；所述探針是將接枝氨基喹啉的樹枝狀聚乙烯亞胺衍生物共價連接在包埋聯(lián)吡啶釕的二氧化硅熒光納米粒子表面，利用比率熒光方法進行細(xì)胞內(nèi)外鋅離子的檢測。該發(fā)明屬于對鋅離子熒光檢測方法的改進，能最大限度地提高檢測靈敏度。

1.一種比率熒光納米探針，其特征在于，包括包埋有聯(lián)吡啶釕的二氧化硅熒光納米粒子，
和通過共價鍵與二氧化硅熒光納米粒子連接的水溶性鋅離子識別探針，水溶性鋅離子識別探
針是由氨基喹啉類衍生物與樹枝狀聚乙烯亞胺接枝形成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的比率熒光納米探針，其特征在于，氨基喹啉類衍生物為8-氯乙酰
基氨基喹啉。
3.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的比率熒光納米探針的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1.水溶性鋅離子識別探針的合成：將氨基喹啉類衍生物、樹枝狀聚乙烯亞胺與無水碳酸鉀
混合，攪拌，進行接枝反應(yīng)，加熱在惰性氣體保護下進行回流回收；
S2.包埋聯(lián)吡啶釕的二氧化硅熒光納米粒子的制備；
S3.比率熒光納米探針的制備；將步驟S1所得的水溶性鋅離子識別探針和步驟S2所得的二
氧化硅熒光納米粒子加入到磷酸緩沖液中，室溫反應(yīng)，即得。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，S2中所述的包埋聯(lián)吡啶釕的二氧化硅熒
光納米粒子的制備采用油包水的反相微乳法制備。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，S3中所述的磷酸緩沖液含有N-羥基琥
珀酰亞胺和(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽。
6.一種鋅離子熒光檢測方法，其特征在于，使用如權(quán)利要求1所述的比率熒光納米探針。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的鋅離子熒光檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
SI.體液中鋅離子的檢測：將比率熒光納米探針加入到離心管中，加入不同濃度的鋅離子，
再用磷酸緩沖液定容，孵育，在365nm紫外燈下拍照，并用熒光分光光度計測定其在
420-750nm范圍內(nèi)的熒光光譜，激發(fā)波長為370nm；
SII.細(xì)胞內(nèi)的鋅離子成像:分別用共聚焦顯微鏡觀察不用外源鋅離子和用外源鋅離子處理的
細(xì)胞，記錄綠色熒光通道和紅色熒光通道熒光信號的改變和二者比值的變化考察熒光納米探
針對鋅離子的響應(yīng)。