本發明描述純化蝶酸、蝶酸類似物及蝶酸衍生物的方法。本發明還描述合成和純化維生素綴合物的方法，包括葉酸FITC綴合物、葉酸類似物以及葉酸和葉酸類似物的衍生物。本發明還描述蝶酸、蝶酸衍生物和類似物及其綴合物的純化形式。

1.一種純化具有下式的化合物的方法：
或其鹽；
該方法包括以下步驟：
(a)使包含所述化合物的溶液與糖基離子交換層析載體接觸；
(b)用pH為10或10以上的流動相洗脫包含所述化合物的第一
種流分；
(c)將第一種流分的pH降低至3或3以下；和
(d)沉淀所述化合物。
2.權利要求1的方法，其中所述溶液還包含葉酸。
3.權利要求2的方法，該方法還包括(e)洗脫含有葉酸的第二種
流分的步驟，其中第一種流分和第二種流分基本分離。
4.權利要求1-3的任一項的方法，其中所述糖基離子交換層析載
體包含糖基陰離子交換樹脂。
5.權利要求4的方法，其中所述糖基陰離子交換樹脂包括纖維
素、直鏈淀粉或其組合。
6.權利要求4的方法，其中所述糖基陰離子交換樹脂選自交聯葡
聚糖凝膠DEAE、交聯葡聚糖凝膠QA、PEI纖維素、QA纖維素、DEAE
纖維素及其組合。
7.權利要求1-3的任一項的方法，其中所述流動相具有11或11
以上的pH。
8.權利要求1-3的任一項的方法，其中所述流動相具有11-13范
圍的pH。
9.權利要求1-3的任一項的方法，其中所述流動相無氨或其鹽。
10.權利要求1-3的任一項的方法，其中所述沉淀步驟產生具有
95％重量或大于95％重量的純度的沉淀物。
11.權利要求1-3的任一項的方法，其中所述沉淀步驟產生具有
98％重量或大于98％重量的純度的沉淀物。
12.權利要求1-3的任一項的方法，其中所述沉淀步驟產生具有
99％重量或大于99％重量的純度的沉淀物。
13.權利要求1-3的任一項的方法，其中所述沉淀步驟產生具有
小于5％葉酸的沉淀物。
14.一種純化具有下式的化合物的方法：
或其鹽；
該方法包括以下步驟：
(a)使包含所述化合物的溶液與陰離子交換層析載體接觸，所述
陰離子交換層析載體選自交聯葡聚糖凝膠DEAE、交聯葡聚糖凝膠
QA、PEI纖維素、QA纖維素、DEAE纖維素及其組合；和
(b)洗脫包含所述化合物的第一種流分。
15.權利要求14的方法，其中所述洗脫步驟中的流動相的pH為
11或11以上。