1.一種共擔載阿霉素和人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的白蛋白納米粒靶向制劑
的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下制備步驟：
（1）制備載阿霉素的白蛋白納米粒
采用去溶劑交聯法制備阿霉素白蛋白納米粒，取牛血清白蛋白適量配制水溶液，用1
摩爾每升的氫氧化鈉溶液調節pH至8.0；
取牛血清白蛋白溶液1毫升，攪拌下向其滴加鹽酸阿霉素乙醇溶液4毫升，加入速度10
毫升/分；
然后，在攪拌下向上述溶液滴加4%的戊二醛乙醇溶液，繼續攪拌2小時后，轉移到旋轉
蒸發器內，在40℃真空條件下旋轉蒸發20分鐘以除去乙醇；得到的產物經10 ℃、14000 轉/
分鐘條件下離心10分鐘，除去離心上清液，再用蒸餾水重復洗滌離心兩次，棄去上清液得到
納米粒；然后向納米粒中添加適量蒸餾水，渦旋分散，得到載阿霉素的白蛋白納米粒；
（2）羧甲基殼聚糖-葉酸偶聯物 CMCS-FA 的合成：
取0.2克葉酸FA溶于10毫升二甲基亞砜中，向其中加入0.1克的N-羥基琥珀酰亞胺 NHS
和0.2 g的N,N'-二環己基碳二亞胺 DCC，其中 FA/NHS/DCC摩爾比為1:2:2 ，室溫活化反應
12小時，直到葉酸全部溶解；向上述溶液中加入1%的羧甲基殼聚糖 CMCS 的磷酸鹽緩沖液
和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽EDC，其中CMCS/FA/EDC摩爾比為1:1:1，繼
續室溫避光攪拌16小時；然后向溶液中滴加氫氧化鈉調節pH至9.0，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖
液透析24小時，然后用水透析24小時后，凍干處理；
（3）制備共包載阿霉素和人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的葉酸靶向白蛋白納米
粒：
利用層層自組裝技術制備共擔載阿霉素和人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的納米
粒；取載阿霉素的白蛋白納米粒溶液1毫升，向其中加入0.25% 聚乙烯亞胺水溶液0.1毫升
使納米粒表面電荷由負變正，攪拌混勻后加入10微克/毫升的人腫瘤壞死因子相關凋亡誘
導配體溶液，攪拌均勻后再加入1.5毫克/毫升的CMCS-FA溶液，pH8.0 磷酸鹽緩沖液配制，
使納米粒電荷由正變負，室溫攪拌30分鐘，即得。
2.按權利要求1所述的一種共擔載阿霉素和人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的白蛋
白納米粒靶向制劑的制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述牛血清白蛋白溶液濃度為為
1.0-2.0%克/毫升。
3.按權利要求1所述的一種共擔載阿霉素和人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的白蛋
白納米粒靶向制劑的制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述阿霉素濃度為0.01-0.05%克/
毫升。
4.按權利要求1所述的一種共擔載阿霉素和人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的白蛋
白納米粒靶向制劑的制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述牛血清白蛋白溶液pH值為7.0-
9.0。
5.按權利要求1所述的一種共擔載阿霉素和人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體的白蛋
白納米粒靶向制劑的制備方法，其特征在于，步驟（3）中所述加入聚乙烯亞胺和CMCS的質量
比為1:4。
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