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一種用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性的試劑盒及其使用方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-06
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201410473101.0 
  • 技術(專利)名稱 一種用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性的試劑盒及其使用方法 
  • 項目單位 武漢康錄生物技術有限公司
  • 發明人 葉倫,王寧,劉金水,李雪梅,李倩,陳剛 
  • 行業類別 智慧健康-物聯網
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 馮格遠
  • 發布時間 2022-01-06  
  • 01

    項目簡介

    本發明屬于生物醫學領域臨床檢測技術中的基因檢測技術,具體涉及一種用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性的試劑盒及其使用方法。本發明所述試劑盒包括3對引物、3條探針、6條PNA序列,1對β-Actin內標引物及1條內標探針,還包括Mg的PCR反應緩沖液、dNTP混合物、Taq酶和ddHO。利用本發明試劑盒能夠對CYP2C19基因多態性位點進行定性檢測,根據SNP位點進行兩管PNA-PCR熒光擴增反應,只需根據兩管熒光曲線是否起線就能進行結果判斷,不會產生人為誤差,假陽性和假陰性率低;本發明試劑盒更容易實現高通量檢測,更能滿足臨床使用。
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  • 02

    說明書

    1.一種用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性的試劑盒,其特征在于,包括3對引物、3條探針、6條PNA序列,1對β-Actin內標引物及1條內標探針,所述3對引物的序列如SEQIDNO.1~SEQIDNO.6所示,所述3條探針的序列如SEQIDNO.7~SEQIDNO.9所示,所述6條PNA序列如SEQIDNO.10~15所示,所述1對β-Actin內標引物的序列如SEQIDNO.16~SEQIDNO.17所示,所述1條內標探針的序列如SEQIDNO.18所示,所述3條探針為Taqman探針,探針5’端的熒光基團為FAM,3’端的淬滅基團為BHQ1,所述1條內標探針為Taqman探針,探針5’端的熒光基團為ROX,3’端的淬滅基團為BHQ1。2.根據權利要求1所述的用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性的試劑盒,其特征在于,還包括Mg2+的PCR反應緩沖液、dNTP混合物、Taq酶和ddH2O。3.根據權利要求1所述的用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性的試劑盒,其特征在于,還包括6個陽性對照品和1個陰性對照品,所述陽性對照品為包含有CYP2C19基因多態性位點681G、681A、836G、836A、-806C或-806T的重組質粒和包含有內標基因的重組質粒的混合物,所述陰性對照品為不包含內標基因和CYP2C19基因多態性位點的重組質粒。4.權利要求1所述試劑盒在制備用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性產品中的應用,其特征在于,包括如下步驟:(1)提取待測人的基因組DNA作為檢測樣品;(2)取1個PCR8聯管,在其中A~F6個管中分別加入檢測樣品,另取一個PCR8聯管,在A~F6個管中分別加入6個不同的陽性對照品,再取一個PCR8聯管,在A~F6個管中分別加入陰性對照品;(3)將PCR8聯管置于熒光PCR儀器中進行熒光PCR擴增反應,采集FAM和ROX熒光信號;(4)結果判斷:a.當陽性對照管均有FAM和ROX熒光信號起線,陰性對照管均無FAM和ROX熒光信號起線,檢測樣品管均有ROX熒光信號起線時,判斷試驗成功;b.根據檢測樣品管A和B的FAM熒光信號是否起線判斷CYP2C19基因681的分型,根據檢測樣品管C和D的FAM熒光信號是否起線判斷CYP2C19基因836的分型,根據檢測樣品管E和F的FAM熒光信號是否起線判斷CYP2C19基因-806的分型。5.根據權利要求4所述試劑盒在制備用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性產品中的應用,其特征在于,所述PCR8聯管中A和B管內含有與檢測人類CYP2C19基因681分型相關的PCR反應液,所述C管和D管內含有與檢測人類CYP2C19基因836分型相關的PCR反應液,所述E管和F管中含有與檢測人類CYP2C19基因-806分型相關的PCR反應液,所述PCR反應液包含與檢測基因位點相對應的引物、探針、PNA序列、內標引物及內部探針、Taq酶、dNTP混合液、Mg2+的PCR反應緩沖液和ddH2O。6.根據權利要求4所述試劑盒在制備用于快速檢測人類CYP2C19基因多態性產品中的應用,其特征在于,所述陽性對照品為包含有CYP2C19基因多態性位點681G、681A、836G、836A、-806C或-806T的重組質粒和包含有內標基因的重組質粒的混合物,所述陰性對照品為不包含內標基因和目的基因位點的重組質粒。
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