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一種CSN8shRNA納米脂質體的制備方法及其應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-24
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310641638.9 
  • 技術(專利)名稱 一種CSN8shRNA納米脂質體的制備方法及其應用 
  • 項目單位 蘇州市立醫院
  • 發明人 居頌文,尹娟,唐靜 
  • 行業類別 醫藥制造-生物藥品
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 蔣紅顏
  • 發布時間 2021-12-24  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種CSN8shRNA納米脂質體(nano-liposome)的制備方法及其在治療炎癥性腸病的應用,通過向磷酸卵磷脂和膽固醇混合物中加入CSN8shRNA質粒緩沖液后進行超聲水浴、過濾、分離、富集等工藝即可制得,制備方法步驟簡單;制得的CSN8shRNA納米脂質體能進入腸道黏膜,有效抑制腸道細胞CSN8的表達,緩解腸炎癥狀,治療效果顯著。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種CSN8shRNA納米脂質體的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
    步驟(1):將磷酸卵磷脂和膽固醇溶于10倍體積的氯仿中,旋轉蒸發,直
    至形成具有均勻薄膜的第一混合物;
    步驟(2):向所述第一混合物中加入1/2第一混合物體積的氯仿,形成第二
    混合物,再加入所述1/3第二混合物體積的CSN8shRNA質粒緩沖液室溫攪拌
    4~8小時形成第三混合物;
    步驟(3):將所述第三混合物在4~37℃條件下,30~50W功率水浴超聲處
    理5~30分鐘,減壓蒸發除去有機溶劑,再補充與步驟(2)中所加氯仿同等體
    積的緩沖液,再進行4~37℃條件下,30~50W功率水浴超聲處理5~30分鐘即得
    脂質體混懸液;
    步驟(4):將步驟(3)制得的脂質體混懸液通過0.1μm的微孔濾膜,
    20000~36000g超速離心20~60min,上層即為所需的CSN8shRNA納米脂質體,
    所述CSN8shRNA納米脂質體的直徑小于等于100nm。
    2.根據權利要求1所述的CSN8shRNA納米脂質體的制備方法,其特征在
    于,所述緩沖液為PBS、HEPES或生理鹽水。
    3.根據權利要求1所述的CSN8shRNA納米脂質體的制備方法,其特征在
    于,所述步驟(4)中將步驟(3)制得的脂質體混懸液通過0.1μm的微孔濾膜
    后,再通過0.02μm的超濾膜進行過濾,取被截留液體,即可富集到所需的
    CSN8shRNA納米脂質體。
    4.根據權利要求1所述的CSN8shRNA納米脂質體的制備方法,其特征在
    于,所述CSN8shRNA質粒是根據RNAi技術設計合成的針對CSN8的編碼基因
    的siRNA(Small?interfering?RNA)編碼序列與表達載體連接而成的。
    5.根據權利要求1所述的CSN8shRNA納米脂質體的制備方法,其特征在
    于,所述CSN8shRNA質粒緩沖液中CSN8shRNA質粒的濃度為
    1μg/ml~1000μg/ml。
    6.根據權利要求1所述的CSN8shRNA納米脂質體的制備方法,其特征在
    于,步驟(1)中磷酸卵磷脂和膽固醇的體積比為(1:1)~(10:1)。
    展開

專利技術附圖

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