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脂肪間充質干細胞向肝星狀細胞和肝內皮細胞同時分化的培養基及方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-30
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710020176.7 
  • 技術(專利)名稱 脂肪間充質干細胞向肝星狀細胞和肝內皮細胞同時分化的培養基及方法 
  • 項目單位 暨南大學
  • 發明人 李靜,肖佳,劉映霞,何留民 
  • 行業類別 健康用品-營養保健品
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 李冰雁
  • 發布時間 2022-01-30  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及細胞培養技術領域,尤其涉及脂肪間充質干細胞向肝星狀細胞和肝內皮細胞同時分化的培養基及方法。本發明提供的培養基能夠將脂肪間充質干細胞誘導同時分化成為星狀細胞和肝內皮細胞,實驗操作簡單,干細胞來源廣泛。以本發明提供培養基對脂肪干細胞誘導分化的效果要顯著優于對照試驗,且分化而來的兩種細胞都具備其典型功能和表達關鍵基因。結果表明,本發明提供的培養基誘導分化23天后,有9.6%的細胞分化為肝星狀細胞類似的細胞,有14.3%的細胞成為人類肝內皮細胞類似的細胞。
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  • 02

    說明書

    1.誘導脂肪間充質干細胞向肝星狀細胞和肝內皮細胞同時分化的方法,其特征在于,包括:第0天~第6天,脂肪間充質干細胞以培養基A培養;第7天~第10天,以培養基B培養;第11天~第14天,以培養基C培養;第15天~第28天,以培養基D培養;所述培養基A包括:基礎培養基和Wnt3a蛋白20ng/mL~80ng/mL、Activin A蛋白50ng/mL~100ng/mL、地塞米松1μmol/L、ITS 2.5μL/mL和FBS 50μL/mL~200μL/mL;所述培養基B包括:基礎培養基和bFGF蛋白2.5ng/mL~10ng/mL、BMP4蛋白10ng/mL~50ng/mL、地塞米松1μmol/L、ITS 2.5μL/mL和FBS 50μL/mL;所述培養基C包括:基礎培養基和aFGF蛋白10ng/mL~50ng/mL、FGF4蛋白2.5ng/mL~10ng/mL、FGF8b蛋白10ng/mL~40ng/mL、地塞米松1μmol/L、ITS 2.5μL/mL和FBS 50μL/mL;所述培養基D包括:基礎培養基和HGF蛋白5ng/mL~20ng/mL、Follistatin蛋白25ng/mL~75ng/mL、地塞米松1μmol/L、ITS 2.5μL/mL和FBS 50μL/mL。2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,第0天~第2天,所述的培養基A中FBS的濃度為200μL/mL;第3天~第6天,所述的培養基A中FBS的濃度為50μL/mL。3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述培養的條件為:37℃,5%CO2,每天更換60v%的新鮮培養基。4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述培養的容器不以matrigel包被。
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