本發(fā)明提供了一種益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果漿粉的制備方法。以鼠李糖乳桿菌，副干酪乳桿菌副干酪亞種，嗜酸乳桿菌，釀酒酵母，產(chǎn)朊假絲酵母五株益生菌為出發(fā)菌株，經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)、粉末凍干菌種制備、復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的復(fù)配，獲得復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉。將濃縮藍(lán)莓果漿按其重量的5％添加白砂糖后，經(jīng)臭氧殺菌，按加糖濃縮果漿固形物重量的0.025％接種復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，30℃靜止保溫發(fā)酵48小時(shí)，冷凍干燥后獲得益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果漿粉。

1.一種益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果漿粉的制備方法，其特征是按下述方法制備：?1)益生菌的選擇及培養(yǎng)基的制備?A菌——鼠李糖乳桿菌CICC6162(Lactobacillus?rhamnosus)，培養(yǎng)基為：蛋白胨2g，酵母提取物1g，大豆蛋白胨1g，蛋白質(zhì)酶解物No.3(Difco)1g，5％檸檬酸鐵2ml，人工海水700ml，蒸餾水300ml，pH?7.5，經(jīng)121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃?zhèn)溆茫?B菌——副干酪乳桿菌副干酪亞種CICC22812(Lactobacillus?paracasei?subsp.paracasei)，培養(yǎng)基為：酪蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，Tween?801.0g，K₂HPO₄?2.0g，MgSO₄.7H₂O?0.2g，MnSO₄.H₂O?0.05g，CaCO₃?20.0g，蒸餾水1.0L，pH6.8，經(jīng)121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃?zhèn)溆茫?C菌——嗜酸乳桿菌CICC6093(Lactobacillus?acidophilus)培養(yǎng)基為：酪蛋白胨10g/L，肉湯提取物10g/L，酵母提取物5g/L，葡萄糖20g/L，吐溫801g/L，K₂HPO₄?2g/L，醋酸鈉5g/L，檸檬酸二銨2g/L，MgSO₄.7?H₂O?0.2g/L，MnSO₄.H₂O?0.05g/L，pH?6.2-6.5，經(jīng)121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃?zhèn)溆茫?D菌——釀酒酵母CICC31447(Saccharomyces?cerevisiae)培養(yǎng)基為：5°Bé麥芽汁，pH?6.2-6.5，經(jīng)121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃?zhèn)溆茫?E菌——產(chǎn)朊假絲酵母CICC31126(Candida?utilis)培養(yǎng)基為：5°Bé麥芽汁，pH?6.2-6.5，經(jīng)121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃?zhèn)溆茫?2)原菌種活化?分別量取0.9％的生理鹽水10ml于5只試管內(nèi)，經(jīng)121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃，將5株益生菌安瓶?jī)?nèi)的凍干菌粉末在無(wú)菌狀態(tài)下全部倒入0.9％的生理鹽水中，震蕩使其溶解，在30℃恒溫箱中靜止活化30分鐘，備用；?3)母發(fā)酵劑的制備?分別量取5株益生菌培養(yǎng)基各200ml于5只500ml三角瓶?jī)?nèi)，121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃，按培養(yǎng)基體積的10％接種2)步驟中已經(jīng)活化的菌種，在30℃厭氧箱內(nèi)靜止培養(yǎng)24小時(shí)，作為母發(fā)酵劑；?4)生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備?首先配制質(zhì)量百分比濃度為10％的脫脂奶乳濁液，分裝于5只500mL三角瓶?jī)?nèi)，每瓶200mL，121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃，分別按2％體積比例接種母發(fā)酵劑，30℃厭氧培養(yǎng)36——40小時(shí)，檢測(cè)5株益生菌發(fā)酵液活菌數(shù)，各發(fā)酵液活菌數(shù)≥10⁹個(gè)/ml，視同為發(fā)酵成熟，如果活菌數(shù)＜10⁹個(gè)/ml，繼續(xù)培養(yǎng)，直至達(dá)到10⁹個(gè)/ml；?5)粉末凍干菌種的制備?將成熟的生產(chǎn)發(fā)酵劑在無(wú)菌條件下導(dǎo)入玻璃安瓶中，液面高度低于1cm，加蓋瓶塞后放入-30℃冰柜速凍，凍結(jié)后將玻璃安瓶用托盤(pán)盛裝，放入凍干機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，制備粉末凍干菌種；?6)復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的制備?按各粉末凍干菌種重量，取A菌粉末2-3份，B菌粉末2-4份，C菌粉末1-2份，D菌粉末2-3份，E菌粉末2-3份，充分混勻后制成復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，用于發(fā)酵濃縮藍(lán)莓果漿，復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉的添加量為發(fā)酵物料固形物重量的0.025％；?7)濃縮果漿的制備?將100公斤藍(lán)莓原果漿低溫減壓濃縮至40-45公斤，按濃縮果漿重量的5％添加白砂糖，攪拌使其溶解，制備濃縮果漿；?8)殺菌?濃縮果漿通臭氧進(jìn)行殺菌，當(dāng)濃縮果漿中臭氧含量在0.2-0.3mg/L時(shí)，停止臭氧通入，密閉無(wú)菌保存20分鐘；?9)升溫?將經(jīng)8)步驟獲得的濃縮漿料，緩慢升溫至30℃；10)復(fù)合益生菌發(fā)酵?按該漿料固形物重量的0.025％添加6)步驟制備的復(fù)合益生菌發(fā)酵劑凍干粉，充分?jǐn)嚢杌靹蚝螅?0℃靜止保溫發(fā)酵48小時(shí)；?11)冷凍干燥?將10)步驟發(fā)酵處理后的物料，放入冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，獲得益生菌發(fā)酵藍(lán)莓果漿粉。?